以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
SHIP2抑制劑(CPDA) | CPDA | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
CPDA是一種新型有效的SHIP2抑制劑,作用于3T3-L1脂肪細(xì)胞,能夠有效改善胰島素抗性。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1415834-63-7 分子式:C??H??ClF?N?O? 分子量:388.8 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
美澳型核果褐腐病菌甲型流感病血凝抗體Human PTPN7 ELISA Kit幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA Kit
海境芽孢桿菌甲型流感病血凝抗體Human PTPN9 ELISA Kit幽門螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)ELISA Kit
大腸埃希菌整合αVβ5抗體Human PTMS ELISA Kit幽門螺桿菌相關(guān)基因蛋白A-IgG(HP-CagA-IgG)ELISA Kit
鄰單胞菌屬*干擾調(diào)節(jié)因子1抗體Human PTPN11(Tyrosine-protein phosphatase non-receptor type 11) ELISA Kit優(yōu)球蛋白(EL)ELISA Kit
葡萄座腔菌白介6Human PTPRE ELISA Kit硬骨(SOST)ELISA Kit
大腸埃希菌γ干擾誘導(dǎo)蛋白16抗體Human PTPN23 ELISA Kit印度猬因子(IHH)ELISA Kit
動物源細(xì)菌耐藥性檢測板-金黃色葡菌球菌整合αVβ1抗體Human PTPN18 ELISA Kit隱熱蛋白(NLRP3/C1orf7/CIAS1/NALP3/PYPAF1)ELISA Kit
矩圓黑盤孢白介-20抗體Human PTPN22( Protein tyrosine phosphatase, non-receptor type 22) ELISA Kit吲哚2,3-雙加氧(IDO)ELISA Kit
卡爾斯伯酵母干擾相關(guān)發(fā)育調(diào)節(jié)因子2抗體Human PTPN2(Tyrosine-protein phosphatase non-receptor type 2) ELISA Kit音猬因子N端(Shh-N)ELISA Kit
黃曲霉白介-1受體相關(guān)激2抗體Human PTPN5 ELISA Kit音猬因子(SHH)ELISA Kit
枯草芽孢桿菌磷化胰島受體β抗體Human PTPN4 ELISA Kit抑制β-B(Inhbb)ELISA Kit
桔青霉磷化胰島受體β抗體Human PTPN9 ELISA Kit抑制β-A(INHBA)ELISA Kit
滅蚊鏈霉菌整合alpha E2 抗體Human PTPN7 ELISA Kit抑制B(INH-B)ELISA Kit
糞腸球菌(糞鏈球菌)整合αV抗體Human PTMS ELISA Kit抑制A(INH-A)ELISA Kit
星座鏈球菌星座亞種免疫球蛋白結(jié)合蛋白1抗體Human PTPRE ELISA Kit抑制(INH)ELISA Kit
深綠木霉胰島樣生長因子1受體抗體Human PTAFR ELISA Kit抑肽(AP)ELISA Kit
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)地奧司明
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)貝母辛
副豬嗜血桿菌Haemophilus│parasuis 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)白花前胡
SHIP2抑制劑(CPDA)CD43/SPN CD43抗體鈉,無水 電泳級, ≥99%
CD44/PGP1 CD44抗體十二烷硫鈉 分子生物學(xué)級,≥98.5% (GC)
CD44v4 CD44V4抗體十二烷硫鈉 離子對色譜級,≥99.0% (GC)
CD44v5 CD44V5抗體化釤(III),六水 99%
CD44v6 CD44V6抗體氟化銀(I) 99%
CD44v7 CD44V7抗體四丁酚 試劑級
CD44v10 CD44V10抗體噻苯隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品
CD45/B220 白共同抗原抗體噻苯隆 用于植物培養(yǎng)