詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱:線粒體檸檬酸(MCA)含量紫外分光光度法
規(guī)格:50管/48樣
測試方法:紫外分光光度法
分類:三羧酸循環(huán)系列
貨號:GOY-01S6584
客戶自備儀器和試劑
商品介紹:
測定意義 CA是線粒體三羧酸循環(huán)的第一個中間產(chǎn)物,由檸檬酸合酶催化乙酰CoA與草酰乙酸合成,其含量是三羧酸循環(huán)強(qiáng)度的主要指標(biāo)之一。 配合測定丙酮酸含量、丙酮酸脫氫酶活性、乙酰CoA含量、檸檬酸合酶活性和CA含量,其中(1)丙酮酸含量和丙酮酸脫氫酶活性變化可以反映糖酵解進(jìn)行程度,(2)綜合分析丙酮酸含量、丙酮酸脫氫酶活性和乙酰CoA含量變化可以反映脂肪酸β-氧化途徑提供的乙酰CoA情況,(3)乙酰CoA含量、檸檬酸合酶活性和CA含量變化可以反映三羧酸循環(huán)進(jìn)行狀況。 測定原理: CA在檸檬酸裂解酶的作用下,生成α-酮酸(草酰乙酸);在弱酸性條件下,α-酮酸進(jìn)一步與苯肼反應(yīng),生成相應(yīng)的α-酮酸苯腙;α-酮酸苯腙在330nm處有吸收峰,該波長下吸光度的變化程度可反映出CA的含量。 自備儀器和用品: 可見分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、1mL石英比色皿、研缽和蒸餾水。 |
實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。
特點(diǎn): 1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時即可完成 2、靈敏度高,操作便捷 3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑 | 儀器: 1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀(比色測定波長為550nm) 2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃) 3、臺式離心機(jī) 4、漩渦混勻器 5、微量移液器 |
樣品測定的準(zhǔn)備:
1、細(xì)胞、細(xì)菌或組織樣品的制備 :
細(xì)菌或細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),棄上清;按照每100萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率20%,超聲3秒,間隔10秒,重復(fù)30次),之后置沸水浴振蕩提取10min;10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測。
組織:稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿;之后置沸水浴振蕩提取10min,10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測。
2、血清(漿)樣品:取100μL血清(漿)加入1mL提取液,充分混勻,之后置沸水浴振蕩提取10分鐘,10000g,常溫離心10分鐘,取上清,冷卻后待測。
3、標(biāo)準(zhǔn)品的處理:稱取1mg,將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋為15、10、8、6、4、2、1、0 μg/ml。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
小鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)試劑盒培養(yǎng)板,二水 99.99% metals basis(劇品)假單胞菌 95%
小鼠絨毛膜促性腺激素(CG)試劑盒培養(yǎng)板三氧化鎢 SP尼日利亞菌素鈉 98%
小鼠絨毛膜促性腺激素(CG)試劑盒標(biāo)板 u型碲 SP寡霉素A 95%
小鼠二(MDA)試劑盒平底標(biāo)板鎢 99.99% metals basis寡霉素B 80%
小鼠二(MDA)試劑盒v型軟板釩粉 99.9% metals basis,100-200 mesh赭曲素A 98%
小鼠超氧化物歧化(SOD)試劑盒培養(yǎng)板水質(zhì)釩標(biāo)樣 995 - 1005 ug/ml V(3+) 的 2% HNO3溶液 (20°C)氨核苷嘌呤霉素 98%
小鼠超氧化物歧化(SOD)試劑盒培養(yǎng)板五二釩 99.99% metals basis(劇品)根赤殼菌素 98%
小鼠C肽(C-Peptide)試劑盒 方形培養(yǎng)皿氧化釔 SP星形孢菌素 98%
小鼠C肽(C-Peptide)試劑盒 樣品杯硝氧鋯 水合物 SP柄曲菌素 98%
小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)試劑盒樣品杯(帶匙)硝氧鋯 水合物 99.99% metals basis柄曲菌素 分析標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)試劑盒采便器氧化鋅 SP鏈黑霉素 98%
小鼠血清總補(bǔ)體(CH50)試劑盒采便器鋅粉 SP衣霉素 98%
小鼠血清總補(bǔ)體(CH50)試劑盒采便器鋅粒 SP硫藤黃素 95%
小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)試劑盒樣品杯硫代乙 98%纈氨霉素 ≥98% (TLC), ≥95% (HPLC), solid
小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)試劑盒樣品杯硫代乙 95%蠣灰菌素A 95%
小鼠胰島素(INS)試劑盒樣品杯(帶匙)氨芐青霉素,三水 分析標(biāo)準(zhǔn)品渥曼青霉素 98%
線粒體檸檬酸(MCA)含量紫外分光光度法猴過氧化物體增殖激活物受體γ輔激活因子1α(PPARγC1α)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒硫鋁無二檸檬桿菌拉丁屬名: Fusarium equiseti
猴活化蛋白C(APC)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 氮化木賊鐮孢菌拉丁屬名: Lentinula edodes
猴甘肽/甘素(GAL)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 氮化香菇拉丁屬名: Haemophilus influenzae Type b
猴血管緊張素I受體抗體(ANG I R-Ab)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Cobicistat (GS-9350)ATCC 10211注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
猴細(xì)絲蛋白Cγ(FLNC)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2,6-二-γ-吡喃斜頂菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
猴磷烯式羧激1(PCK1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2,6-二-γ-吡喃相思根瘤菌拉丁屬名: Variovorax boronicumulans
猴抗膠原蛋白抗體(CLA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 2,6-二-γ-吡喃聚貪氏菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
猴泛素蛋白D(UBD)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒柄曲菌素枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Nocardioides plantarum
猴色氨酰tRNA合成(WARS)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒柄曲菌素Nocardioides拉丁屬名: Leclercia adecarboxylata
猴IgA Fc片段受體(FcaR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒磷氫鋇非脫羧勒克菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
猴成纖維生長因子21(FGF21)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒磷氫鋇枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Beauveria bassiana
猴白調(diào)節(jié)素(LR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 無水化鉻(Ⅱ)球孢白僵菌拉丁屬名: Sporobolomyces salmonicolor
猴血管內(nèi)皮生長因子受體3(VEGFR3/Flt4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-溴-4-吡啶赭色擲孢酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
猴晚期糖化終末產(chǎn)物受體(AGER)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 2-溴-4-吡啶釀酒酵母注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
猴絲氨蛋白(PRSS)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 硫代苯酯美澳型核果褐腐病菌拉丁屬名: Agrococcus jenensis
猴黑素轉(zhuǎn)鐵蛋白(MFI2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒硫代苯酯耶納農(nóng)球菌拉丁屬名: Bacillus subtilis