詳細介紹
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Kovac試劑
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:100ml|500ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
用途: 又稱柯氏試劑或吲哚試劑,用于吲哚實驗。 注意事項: 陽性呈紅色,即形成玫瑰吲哚,屬于一種顯色反應(yīng)試劑,主要成分為對二甲等。 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
2,2'-聯(lián)四唑-1,1'-二基(洛沙坦雜質(zhì))英文名稱: 1-BromopyreneT淋巴凋亡相關(guān)蛋白TDAG51抗體包裝500g
2,2-二基-4-異基-1,3-并二茂英文名稱: 4-Bromopyrene蛋白調(diào)解因子9抗體包裝25g
2,3,4-三-O-酰-泊酚-β-D-葡萄糖苷...英文名稱: 1,6-Diaminopyrene胰腺激抗體包裝5g
2,3-去亞異基托吡酯英文名稱: 1,3-Diaminopyrene纖溶相關(guān)蛋白B2抗體包裝1g
2,3-脫氫鈉鹽英文名稱: 2,7-Di-tert-butylpyrene多聚合α/β/γ抗體包裝5g
2,4-二(三基硅烷基)-5-尿嘧啶英文名稱: 1-Nitropyrene含脯突觸相關(guān)蛋白相互作用蛋白1抗體包裝1g
2,4-二基-6-基-7-蝶啶英文名稱: 4-Nitropyrene外周蛋白2抗體包裝5g
2-(R)-[1-(R)-(3,5-二(三基)基...英文名稱: 2-Aminofluorene區(qū)帶蛋白PZP抗體包裝100mg
2-[(2,6-二)基]英文名稱: 2-Amino-9-fluorenone蛋白香葉烯基轉(zhuǎn)移1β(FTβ)抗體包裝1g
2-(巰基)腺苷 5'-三磷四鈉鹽合物英文名稱: 2-Amino-9,9-dimethylfluorene原鈣粘蛋白15抗體包裝250mg
2-基-5,6-二-3(4H)-喹唑啉醋(阿那格...英文名稱: 9-Bromofluorene原鈣粘蛋白β2抗體包裝1g
2-基-6,8-二羥基嘌呤鹽鹽英文名稱: 2-Bromofluorene原鈣粘蛋白β4抗體包裝25g
2-基-6-羥基-8-巰基嘌呤英文名稱: 2-Bromo-9-fluorenone原鈣粘蛋白γ10抗體包裝5g
2-基-6-巰基嘌呤-9-D-核苷合物英文名稱: 2-Bromo-9,9-dimethylfluorene原鈣粘蛋白γA4抗體包裝1g
2-基腺苷英文名稱: 2,7-Diaminofluorene原鈣粘蛋白γA2抗體包裝25g
乳酪棒桿菌Corynebacterium│casei 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品谷脫羧65試劑盒木糖;純品型;標準品;有證書
總狀毛霉Mucor│racemosus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品谷脫羧試劑盒果糖成分分析標準物質(zhì)
鏈格孢霉屬Alternaria│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品谷受體試劑盒糖精鈉;純品型;標準品;有證書
Kovac試劑短桿狀馬賽 1,3,5-三(4-溴苯基)苯膜結(jié)合型前列腺E合成1Elisa
西奈青霉 4-(三氟甲基)環(huán)己酮磷酸化P38蛋白Elisa
抗輻射鏈霉 順式環(huán)己-1,2-二甲酰亞磷酸化c-jun氨基末端蛋白激Elisa
哈茨木霉 4-羥基-2,6-二甲酸RNA聚合轉(zhuǎn)錄終止因子ⅠElisa
松鼠葡萄球松鼠亞種 2-溴肉桂酸維甲酸Elisa
紅色紅曲霉 3--2-甲酸Ca-Mg-ATPElisa
根瘤 4--2-甲酸黃體生成受體Elisa
大豆慢生根瘤 2-萘乙白介17DElisa
黑腐皮殼 L-精氨酸硝酸鹽基質(zhì)γ羧基谷氨酸蛋白Elisa
中華根瘤 6--5-氮雜Ⅰ型膠原C端肽β特殊序列Elisa
解淀粉芽孢桿解淀粉亞種 三(三氟磺酸)鋁鈣調(diào)Elisa
竹喙球 2--1,1,1-氧基乙烷α酮戊二酸Elisa
猴頭菇 8-溴甲基喹啉雌酮Elisa
鏈格孢 3-甲三鹽脫氫表雄酮硫酸酯Elisa
釀酒酵母 丁酰乳酸丁酯聚(ADP核糖)聚合1Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)