商品介紹:
SQ22536是一種有效的腺苷酸環(huán)化酶(AC)抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:17318-31-9 純度:98.43% 分子式:C?H??N?O 分子量:205.22 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
盤長孢狀盤孢磷化HER2受體抗體Human SGPP1(Sphingosine-1-phosphate phosphatase 1) ELISA Kit大鼠過氧化氫(CAT)免疫試劑盒
凍干粉 腸道出血性大腸埃希氏菌(EHEC)(陽性)組蛋白去乙酰化6抗體Human Synaptotagmin-11 ELISA Kit大鼠過敏/補(bǔ)體片斷4a(C4a)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌枯草亞種磷化組蛋白去乙酰化6抗體Human SYNGAP1 ELISA Kit大鼠果糖(FRA)免疫試劑盒
假單胞菌組蛋白去乙酰化7抗體Human SUPT6H ELISA Kit大鼠胱抑SN(CST1)免疫試劑盒
黃硬皮馬勃磷化組蛋白去乙酰化7抗體Human SUPT7L ELISA Kit大鼠胱抑SA(CST2)免疫試劑盒
粉紅單端孢霉組蛋白去乙酰化8抗體Human SUPV3L1 ELISA Kit大鼠胱抑S(CST4)免疫試劑盒
光帽磷傘磷化HER4抗體Human SURF1 ELISA Kit大鼠胱抑D(CST5)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌組tRNA連接抗體Human SURF2 ELISA Kit大鼠胱天蛋白9(Casp-9)免疫試劑盒
Polyangium fumosum 雞新城疫血凝-神經(jīng)抗體Human FKBP8(Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase FKBP8) ELISA Kit大鼠胱天蛋白8(Casp-8)免疫試劑盒
冷解糖芽孢桿菌熱休克蛋白105抗體Human SUV39H1 ELISA Kit大鼠胱天蛋白7(CASP7)免疫試劑盒
普氏菌肝核因子1α抗體Human SUV39H2 ELISA Kit大鼠胱天蛋白3(Casp-3)免疫試劑盒
多主葡萄殼菌缺氧誘導(dǎo)因子1β /HIF-1β抗體Human SUZ12 ELISA Kit大鼠胱硫-γ-裂解(CSE)免疫試劑盒
釀酒酵母熱休克轉(zhuǎn)錄因子2抗體Human STT3A ELISA Kit大鼠胱硫β-合(CBS)免疫試劑盒
少根根霉HA tag標(biāo)簽抗體Human STXBP2 ELISA Kit大鼠瓜免疫試劑盒
杰丁畢赤酵母缺氧誘導(dǎo)基因1蛋白抗體Human STT3B ELISA Kit大鼠固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1C(SREBP-1C)免疫試劑盒
球孢白僵菌人絨毛膜促性腺激α 亞基單抗Human STXBP1(Syntaxin-binding protein 1) ELISA Kit大鼠固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1A(SREBP-1A)免疫試劑盒
弧菌Vibrio│sp. 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.5% (GC)銀杏內(nèi)酯J
亞細(xì)亞菌屬Asaia│sp. 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,>99%(GC)灰氈毛忍冬皂苷乙
色鹽桿菌Chromohalobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,≥99.5%(GC)人參皂苷Ro
腺苷酸環(huán)化酶(AC)抑制劑(SQ22536)Adenylyl cyclase/AC 腺苷環(huán)化抗體3-氨-2-惡唑烷酮 分析標(biāo)準(zhǔn)品
ACE1 血管緊張轉(zhuǎn)換ACE1抗體抗壞血鈣 分析標(biāo)準(zhǔn)品
ACA11 擬南芥ACA11抗體阿特拉津 99%
AHA3 AHA3抗體(擬南芥)1-氨-5-萘酚 97%
ACE2 ACE2抗體4-雄烯-11β--3,17-二酮
ACEI 血管緊張1轉(zhuǎn)換抑制劑抗體2,2-雙[4-(4-氨苯氧)苯]烷 98%
Acetyl CoA Carboxylase 酰羧化抗體3-溴肉桂 98%
Phospho-Acetyl CoA Carboxylase(Ser79) 化酰羧化抗體1,4-二(硅烷)苯 96%