產(chǎn)品屬性:
中文名稱:JYBL-Ⅲ脫鈣液
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:500ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
用途: 組織脫鈣液 注意事項(xiàng): 主要由50%甲酸、福爾馬林等組成。 儲(chǔ)存條件:室溫,12個(gè)月 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
胡蘿卜苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Kynurenine 磷化電壓門控性通道蛋白Kv4.2抗體包裝25g
胡麻屬苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sulfadimethoxine KT3 tag抗體包裝5g
湖北貝母(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sulfadimethoxine 激肽釋放1抗體包裝1g
葫蘆巴(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Oseltamivir acid激肽釋放3/舒血管3抗體包裝25g
葫蘆巴堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: alpha-Arbutin 激肽釋放4抗體包裝5g
葫蘆巴堿鹽鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: alpha-Arbutin 組蛋白H3賴9基化1C抗體包裝100g
葫蘆A英文名稱: Cidofovir dihydrate 驅(qū)動(dòng)蛋白家族Member14蛋白抗體包裝25g
葫蘆B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: AUY922Ki67蛋白抗體包裝5g
葫蘆D;葫蘆苦D英文名稱: Cefotetan acid 離子通道蛋白EAG1抗體包裝5g
葫蘆E(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: AZD-8055 轉(zhuǎn)染抑癌基因KLF6抗體包裝100g
槲寄生(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Plerixafor,AMD3100KLF樣轉(zhuǎn)錄因子8抗體包裝25g
槲皮苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: (D-Ala7)-Angiotensin I/II (1-7);A779胞質(zhì)接頭蛋白Keap1抗體包裝5g
槲皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Benzophenone磷化腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子5抗體包裝25g
槲皮-3-O-β-D-吡喃葡糖苷;槲皮-3-葡萄...英文名稱: Benzophenone磷化抑癌蛋白EZH2抗體包裝5g
槲皮-3-O-β-D-木糖甙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pirenzepine dihydrochlorideAEG-1抗體包裝1g
馬腺疫鏈球菌獸疫亞種Streptococcus│equi subsp.zooepidemicus 質(zhì)量規(guī)格:溶解性數(shù)據(jù)為19.8,分子量小于5000抗透明帶抗體試劑盒格列脲;Glibenclamide
: ATCC26282資源名稱: 米黑根毛霉 質(zhì)量規(guī)格:≥99.0%,BR抗天然脫氧核糖核抗體試劑盒高三尖杉酯堿;Homoharringto
醋化醋桿菌Acetobacter│aceti 質(zhì)量規(guī)格:≥98.5%(HPLC),BR,一合物抗糖蛋白抗體試劑盒高車前苷;Homoplantaginin
JYBL-Ⅲ脫鈣液空腸彎曲桿 3-氨基-4-氯苯L-異天冬氨酸-甲基轉(zhuǎn)移ⅠElisa
草鏈霉 3-氨基-5-氯苯核糖體蛋白Elisa
粉褐粉孢牛肝* 2,4,6-三氯苯肼錳超氧化物歧化Elisa
空泡單胞 3-羥基-2,4,6-三苦馬豆Elisa
釀酒酵母 2-乙酰氨基-6-甲基吡啶玉米黃質(zhì)環(huán)氧化Elisa
中慢生華癸根瘤 2-氨基-4-噻唑乙酸乙酯錳超氧化物歧化Elisa
植物乳桿 2-甲氧基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二雜氧戊烷-2-基)吡啶3-磷酸甘油脫氫Elisa
拜氏梭 6-溴-1,3-苯并噻唑磷脂酸磷酸Elisa
雷斯青霉 N-芐基哌氨基糖苷類-3-磷酸轉(zhuǎn)移Elisa
赤霉 二苯甲酮亞鹽酸鹽轉(zhuǎn)酮Elisa
白靈菇 1-溴-2,3-丁二酮5羥色Elisa
地霉半乳糖酵母 2,3,4,5-四氟苯甲果膠甲酯Elisa
慢生根瘤 特戊酸甲酯煙堿去甲基化Elisa
赤曲霉 1,1-二苯基乙烯酸性磷酸酯Elisa
發(fā)酵畢赤酵母 4-羥基-2,6,7-三惡-1-磷酸二環(huán)[2.2.2]辛烷 1-氧化物維生B3Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)