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詳細介紹
商品介紹：
此試劑盒是用于測定細胞增殖或毒性試驗中活細胞數目的一種高靈敏度，無放射性的比色檢測法。實驗的靈敏度比其它如MTT, XTT 或MTS 高。由于新型細胞增殖及毒性檢測溶液相當穩定，并且對細胞沒有毒性，可直接加入到細胞樣品中長時間孵育。 操作方法 1. 96 孔板加入細胞100μL/孔（約1×104），置37℃ 5%CO2 細胞培養箱培養24 小時。2.加入適當濃度的受試化合物。3.將96 孔板在37℃，含5% CO2 空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。 4. 向各孔中加入10 μl 的新型細胞增殖及毒性檢測溶液。 5. 37℃下孵育1～4 小時。 6. 酶標儀在450nm 波長處檢測每孔的光密度。 結果分析 1. 細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加新型細胞增殖及毒性檢測溶液，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加新型細胞增殖及毒性檢測溶液，無細胞），各重復孔的OD 值取均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100 2. 求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。 |
產品屬性：
中文名稱：CCK-8法細胞增殖檢測試劑盒
英文名稱：英文名稱
產品規格：500T
發貨周期：1～3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調控；
⑤細胞分化及其調控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
CD30分子(CD30)英文名稱：CD30 ELISA Kit大腦蛋白2抗體包裝1g
CD19分子(CD19)英文名稱：CD19 ELISA KitB轉錄激活因子抗體包裝250mg
CC趨化因子受體6(CCR-6)英文名稱：CCR-6 ELISA KitBCL6B抗體包裝5g
cAMP反應元件結合蛋白(CREB)英文名稱：CREB ELISA KitBAP31蛋白抗體包裝1g
Ca-ATP(Ca-ATPase)英文名稱：Ca-ATPase ELISA Kit支鏈基轉2抗體包裝1g
B因子(BF)英文名稱：BF ELISA KitBCL2相關蛋白A1抗體包裝250mg
B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)英文名稱：Bcl-2 ELISA KitB淋巴瘤蛋白3抗體包裝5g
B細胞淋巴瘤-XL(Bcl-xl)英文名稱：Bcl-xl ELISA Kit轉錄因子MYB相關蛋白B抗體包裝1g
B細胞活化因子(BAFF)英文名稱：BAFF ELISA Kit防御β1/Defensin β1抗體包裝25g
BH3結構域凋亡誘導蛋白(Bid)英文名稱：Bid ELISA KitB活化因子受體抗體包裝5g
Bcl-2相關X蛋白(BAX)英文名稱：BAX ELISA KitTNF家族B激活因子抗體包裝1g
Apelin 13(AP13)英文名稱：AP13 ELISA Kit蛇巴曲抗體包裝5g
apelin 12(AP12)英文名稱：AP12 ELISA Kit大腦蛋白2抗體包裝100g
Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)英文名稱：Col Ⅳ ELISA Kit程序性死亡配體1抗體包裝25g
Ⅲ型前膠原肽(PⅢP)英文名稱：PⅢP ELISA KitB7-H4抗體包裝1g
糖還原相關蛋白質抗體促狀腺胚胎因子(TEF)MDM2 antagonist nutlin-3 is a potent inducer of apoptosis.
CCK-8法細胞增殖檢測試劑盒微小毛霉 5-溴吡啶-3-（N-乙基）甲酰磷酸化IκB激酶-α檢測試劑盒
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Pseudomonas eucalypticola 3,5-二氯-2,4,6-三氟吡啶磷酸化α-氨基羥甲基惡唑酸檢測試劑盒
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短小芽孢桿 6-三氟甲基-2-氧化磷酸化肌球蛋白輕鏈檢測試劑盒
短小芽孢桿 4-氟-2-甲氧基苯酸磷酸化神經絲H檢測試劑盒
多形環紋炭團 3-氯-2,4,5,6-四氟吡啶磷酸化外信號調節激酶檢測試劑盒
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瑞士乳桿 三(6,6,7,7,8,8,8-七氟-2,2-二甲基-3,5-辛二酮基)鐠(Ⅲ)[核磁共振位移試劑]磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶檢測試劑盒
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粗糙脈孢 6-乙酸基-7-甲氧基-3H-喹唑啉-4-酮磷酸化信號傳導子及轉錄激活子3檢測試劑盒
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