詳細介紹
商品介紹:
用途: 乙肝病毒/HBV染色 注意事項: 維多利藍染色液比較穩(wěn)定,室溫可放置3-4年,并可反復使用。肝細胞內(nèi)的HBsAg陽性物質(zhì)呈藍色,彈性纖維、脂褐素、肥大細胞也染藍色,胞核呈紅色。不著染膽色素。 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
4×50ml | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
1,4,7-三基哌啶-1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二...英文名稱: Coronene一種腫瘤抑制基因抗體(N端)包裝5g
1-(6-Chloro-9H-咔唑-2-yl)乙酰基 ...英文名稱: Coronene (purified by sublimation)腺苷單磷活化蛋白激α1/AMPK α 1抗體包裝1g
1-β-D-呋核亞硝尿-1,2,4-三唑-3-羧酯英文名稱: Corannulene維生K依賴的蛋白C重鏈抗體包裝5g
1-含氧的布洛芬英文名稱: 2,5-Diphenyl-1,3,4-oxadiazole神經(jīng)叢蛋白A1抗體包裝1g
1-基-煙酰化物英文名稱: 2,5-Di(1-naphthyl)-1,3,4-oxadiazolep21激活激4抗體包裝25g
1-基英文名稱: 9,10-Di(1-naphthyl)anthracene磷化p21激活激4/5/6抗體包裝5g
1-基吲唑-3-羧(格拉司瓊雜質(zhì)D)英文名稱: 2,3,6,7,10,11-Hexakis(hexyloxy)triphenylene磷化p21激活激1/2抗體包裝100ml
1-萘乙酰精三鹽英文名稱: Perylene磷化p21激活激1/2抗體包裝25ml
1-羥基布洛芬(布洛芬雜質(zhì)))(非對映異構(gòu)體混合物)英文名稱: Perylene (purified by sublimation)磷化p21激活激2抗體包裝5ml
1-去 2-基格拉司瓊(格拉司瓊雜質(zhì)A)英文名稱: 1,1,4,4-Tetraphenyl-1,3-butadiene磷酯Cγ2抗體包裝10g
1-去 格拉司瓊(格拉司瓊雜質(zhì)B)英文名稱: Triphenylene磷化血小板源性生長因子受體-α抗體包裝50g
1-月桂酰-3-英文名稱: meso-Tetraphenylchlorin磷化血小板源性生長因子受體-α抗體包裝100g
10-反式-阿托伐他汀(阿托伐他汀雜質(zhì)AT10)((3...英文名稱: Tetraphenylporphyrin (Chlorin free)P73腫瘤抑制基因抗體包裝25g
10-反式-阿托伐他汀縮合物叔丁基酯英文名稱: 2,4,6-Triphenyl-1,3,5-triazine表觀抑制因子Polycomb家族成員PCGFl蛋白抗體包裝25g
10-羥基華法林(非對映異構(gòu)體混合物)英文名稱: 1,3-Diphenyl-1,3-propanedioneG蛋白偶聯(lián)嘌呤受體p2y10抗體包裝5g
泡盛曲霉Aspergillus│awamori 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標準品過氧化試劑盒低聚果糖-蔗果五糖;純品型;標準品;有證
桔灰青霉Penicillium│aurantiogriseum 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRS轉(zhuǎn)移TT試劑盒低聚果糖-蔗果四糖;純品型;標準品;有證
副豬嗜血桿菌Haemophilus│parasuis 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,S構(gòu)型,標準品試劑盒低聚果糖-蔗果三糖;純品型;標準品;有證
乙型肝炎病毒染色液(Tanaka維多利亞藍法)亞銹褐褶 6-溴-2,3-二氮雜萘酮活躍腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子Elisa
大腸埃希 5-甲氧基-2-甲基-3-乙酸甲酯α1微球蛋白Elisa
球孢白僵 1-Boc-母親DPP同源物4Elisa
Taibaiella 2,2-二甲基-1-視網(wǎng)膜母瘤蛋白1Elisa
達班湖喜鹽芽孢桿 1-甲基-3-甲脫腳病病Elisa
紅球 2--4-基嘧啶單核趨化蛋白2Elisa
米根霉 2,3,5-三溴吡啶白三烯E4Elisa
葉點霉屬 2-溴-3--5-(三氟甲基)吡啶Wnt-16蛋白Elisa
塔賓曲霉 5-溴-3--7-氮雜神經(jīng)酪氨酸激受體1Elisa
矮小青霉 3-氟-5-吡啶神經(jīng)酪氨酸激受體2Elisa
發(fā)酵畢赤酵母 8--5-氨基喹啉腫瘤壞死因子受體超家族成員1BElisa
香菇 3-氨基異煙酸膠原吡啶交聯(lián)Elisa
枯草芽孢桿 十二烷基二苯二磺酸鈉TAU-1蛋白Elisa
芽胞桿 來氟洛米TAU-5蛋白Elisa
皺紋假單胞 (2-甲氧基-5-)乙酸白血病病抗體Elisa