詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:MEK抑制劑(PD98059)
英文名稱:PD98059
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
英文名稱:PD98059 產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg PD98059是一種MEK抑制劑,IC50為5μM,也抑制TCDD結合到芳香烴受體(AHR),IC50為4μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:167869-21-8 純度:99.45% 分子量:267.28 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大腸埃希菌趨化因子受體1抗體Human TPPP(Tubulin Polymerization Promoting Protein) ELISA Kit人無花果2(FCN2)免疫試劑盒
米曲霉磷化原癌基因c-Raf抗體Human TrxR1(Thioredoxin Reductase 1) ELISA Kit人烏頭2(ACO-2)免疫試劑盒
產氣莢膜梭菌 D型磷化致癌基因C-Myc抗體Human TRY(Trypsin) ELISA Kit人蝸牛同源物2(SNAI2)免疫試劑盒
薄邊蜂窩孔菌CD33抗體Human TSHRAb(Thyroid Stimulating Hormone Receptor Antidoby) ELISA Kit人蝸牛同源物1(果蠅)樣1蛋白(SNAIL1)免疫試劑盒
黑曲霉磷化原癌基因c-kit抗體Human TSP-1(Thrombospondin-1) ELISA Kit人胃粘膜相關淋巴樣組織淋巴瘤抗體(MALT Lymphoma Ab)免疫試劑盒
銅綠假單胞菌磷化原癌基因c-Jun抗體Human ucOC(Undercarboxylated Osteocalcin) ELISA Kit人胃內因子(GIF)免疫試劑盒
果生鏈核盤菌離子通道蛋白3抗體Human UBE1L(Ubiquitin Activating Enzyme E1 Like Protein) ELISA Kit人胃泌調節免疫試劑盒
四川散斑殼磷化周期E抗體Human TP63(Tumor Protein p63) ELISA Kit人胃泌抗體(GCA)免疫試劑盒
針層孔菌屬磷化分裂周期蛋白25C抗體Human UBD(Ubiquitin D) ELISA Kit人胃泌釋放肽前體(ProGRP)免疫試劑盒
擬可可毛球二孢磷化周期依賴性激9抗體Human tPA(Plasminogen Activator, Tissue) ELISA Kit人胃泌釋放多肽(GRP)免疫試劑盒
乳乳球菌乳脂亞種磷化Connexin 43蛋白抗體Human TPA(Tissue Polypeptide Antigen) ELISA Kit人胃泌(Gastrin)免疫試劑盒
釀酒酵母絲切蛋白抗體Human TrxR1(Thioredoxin Reductase 1) ELISA Kit人胃動(MTL)免疫試劑盒
藤黃微球菌磷化皮層肌動蛋白抗體Human TPS(Tryptase) ELISA Kit人胃動蛋白2(GKN2)免疫試劑盒
土生哈薩克斯坦酵母磷化周期B1抗體Human TNPO2(Transportin 2) ELISA Kit人胃蛋白原II 免疫試劑盒
短波單胞菌磷化周期B1抗體Human TPPP(Tubulin Polymerization Promoting Protein) ELISA Kit人胃蛋白原I 免疫試劑盒
凍土毛霉磷化cyclin D1抗體Human TNX(Tenascin X) ELISA Kit人胃蛋白原C(PG-C)免疫試劑盒
暫無Paenisporosarcina│macmurdoensis 質量規格:>98%,BRDAB2互作蛋白試劑盒格列脲
毛柄金錢菌(金針菇)Flammulina│velutipes 質量規格:BRC型凝集結構域家族4成員E試劑盒高車前苷
黑木耳Auricularia│auricula-judae 質量規格:>98%,分子生物學級C肽試劑盒佛手柑
MEK抑制劑(PD98059)桔林油脂酵母 雙聯(2-甲基-2,4-戊二)酸酯脂聯受體1Elisa
淡紫擬青霉(現1) 2-(溴甲基)苯酸脂聯受體2Elisa
副豬嗜血桿 丁基三化錫脂質運載蛋白2Elisa
小麥粉 水分、灰分 2,3-二氫-5-基-1-苯并呋喃直接膽紅Elisa
豇豆慢生根瘤 (1R,2R)-二[(2-甲氧基苯基)苯基磷]乙烷中介Elisa
香菇 無水醋酸鋅中性粒彈性蛋白Elisa
大腸埃希氏 4-溴甲基-3-甲酸中性粒彈性蛋白2Elisa
玫瑰擬層孔 2,5-二甲基-2,5-二羥基-1,4-二噻烷中性粒明膠相關脂質運載蛋白Elisa
黃赭色鏈霉 (R)-(-)-N,N-二甲基-1-(2-聯苯膦基)二茂鐵乙中性內肽;腦啡肽Elisa
球孢白僵 1-(2--3-吡啶基)-乙酮腫瘤標志物;糖類抗原724Elisa
淡紫紫霉 N-Α-叔丁氧羰基-D-蘇氨酸腫瘤壞死因子αElisa
葛氏沙雷氏 縮水甘油腫瘤壞死因子βElisa
產黃青霉 (S)-N,N-二甲基-1-[(R)-1',2-雙(二苯基膦基)二茂鐵基]乙腫瘤壞死因子γElisa
鴿痘病 (S)-(+)-N,N-二甲基-1-(2-聯苯膦基)二茂鐵乙腫瘤壞死因子受體1Elisa
霍氏分支桿 3-硝基肉桂酸腫瘤壞死因子受體相關因子6Elisa
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)