產(chǎn)品屬性:
中文名稱:EB染色液
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:100T
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
EB染色液可用于細胞凋亡檢測,也可用于普通的細胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色,染色后可用熒光顯微鏡檢測或流式細胞儀檢測。EB不能穿過活細胞的細胞膜,然而可以通過死細胞破損的細胞膜而對細胞核DNA染色。EB含有一個可以嵌入的堆積堿基之間的一個平面基團,這個基團的固定位置及其與堿基的密切接近,導(dǎo)致染料與DNA結(jié)合并呈現(xiàn)熒光。 儲存條件:4℃避光保存。 有效期:一年。 |
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
地膚子皂苷Ic(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Copper(II) oxalate hydrate卷曲蛋白FZD7抗體包裝25g
(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Copper(II) sulfate, anhydrous口蹄疫病A型抗體包裝500g
地骨皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Creatinine磷化粘著斑激抗體包裝1g
地瓜藤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Crocein scarlet 7B人纖維蛋白原抗體包裝5g
地黃(生地黃)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Crystal ponceau 6R鋅指蛋白798抗體包裝25g
地錦草(斑地錦)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cyclocytidine肽基脯酰順反異構(gòu)FKBP10抗體包裝5g
地錦草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cytidine-5'-triphosphate (CTP), 3sodium肽基脯酰順反異構(gòu)FKBP11抗體包裝250g
地龍(參環(huán)毛蚓)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cytochalasin AFKBP135蛋白抗體包裝50g
地稔(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cytochalasin C肽基脯異構(gòu)FKBP25抗體包裝1g
地蜈蚣(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cytochalasin D肽基脯異構(gòu)FKBP8抗體包裝250mg
地榆(地榆)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cytochalasin E磷化叉頭蛋白L2抗體包裝100g
地榆皂苷II(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D-(+)-Camphoric acid叉頭蛋白N2抗體包裝25g
地榆皂苷I(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D-(+)DBTA, Dibenzoyl-D-tartaric acid, monohydrate磷化叉頭蛋白家族1抗體包裝50MG
滇藏五味子G英文名稱: DATD, (+)-N,N'-Diallyltartramide磷化叉頭蛋白家族1抗體包裝1g
滇桂艾納香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DDSA, dodecenylsuccinic anhydrous旋轉(zhuǎn)異構(gòu)FKBP6抗體包裝250mg
巴氏醋桿菌Acetobacter│pasteurianus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR神經(jīng)母瘤抗體試劑盒千金子甾;Euphobiasteroi
球孢白僵菌Beauveria│bassiana (Bals.-Criv.) Vuill. 質(zhì)量規(guī)格:UV法含量測定神經(jīng)節(jié)苷脂試劑盒氫化原阿片堿;Hydroprotopin
鮑氏志賀菌Shigella│boydii 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR神經(jīng)節(jié)苷脂試劑盒7-羥基-5,8-二氧基黃烷;7-H
EB染色液大腸埃希氏 度骨化化高鐵血紅蛋白Elisa
黑曲霉 Tofacitinib (CP-690550) Citrate瓜氨酸化組蛋白H3Elisa
谷氨酸棒桿 CP-724714轉(zhuǎn)錄因子活化蛋白2CElisa
*百脈根根瘤 Raltegravir (MK-0518)Janus激3Elisa
托湖萊茵海默氏 Apixaban溶質(zhì)載體家族3成員2Elisa
黑曲霉 PNU-120596熱休克蛋白90βElisa
側(cè)孢短芽孢桿 Cyclophosphamide酸Elisa
長枝木霉 Scopine腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6Elisa
棱柱散尾 EX 527 (Selisistat)骨架關(guān)聯(lián)蛋白4Elisa
枯草芽胞桿 EltrombopagB因子Elisa
糞腸球 NifuraH因子Elisa
不動桿屬 Purmorphamine間粘附分子2Elisa
枯草芽孢桿 EdoxabanCereblon蛋白Elisa
巨大芽胞桿 Salmon Calcitonin Acetate絲氨酸;蘇氨酸蛋白激4Elisa
根瘤 R-1479肌動蛋白結(jié)合蛋白Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)