產品名稱：A549, 人肺癌細胞系說明書
英文名稱：A549, human lung cancer cell lines
規格：5×105cells/瓶
產品貨號：GOY-X0117
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公司向您推薦細胞的詳細說明：

細胞培養的優點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
細胞培養操作規程：
主要功能：
（1）血管平滑肌細胞的再生能力是原發血管病變的重要因素。
（2）表達鈣通道及ICAM-1和VCAM-1，參與血管壁的炎癥反應。
（3）與血管疾病的進展和穩定有關。
 生理變化：
（1）主動脈硬化。
（2）主動脈瘤
（3）主動脈鈣化。
 腎上腺素能受體β3抗體prealbumin96T

 腎上腺髓質素抗體Proprotein Convertase Subtilisin;Kexin Type 9XW-RS-01396T

 腎上腺髓質素抗體(N端20肽)PGI2XW-RS-01496T

 腎上腺髓質素受體抗體Prostate stem cell antigenXW-RS-01596T

 嗜酸粒細胞趨化蛋白22抗體Prostaglandin D2TF-300-L-R-S96T

 嗜酸粒細胞趨化蛋白3抗體Prostaglandin E1TXLF-1096T

 嗜酸粒細胞趨化蛋白抗體Prostaglandin E2 濾芯的吸嘴 96T

 嗜中性粒細胞抗原CD177抗體Prostaglandin F2αPCR-2CP-RT-C96T

 鼠抗人CD4單克隆抗體PGF2α recepor96T

 鼠抗人CD8單克隆抗體prostatic acid phosphatase3、96孔深孔板96T
Cell Meter™ Fluorimetric Cell Cytotoxicity Assay KitHPLC≥98%T25培養瓶CLA ELISA Kit

Cell Meter™ Viability Test Kit *Blue Fluorescence*HPLC≥98%T25培養瓶DPT ELISA Kit

Cell Meter™ Viability Test Kit *Green Fluorescence*HPLC≥98%T25培養瓶Cortactin,CTTN ELISA Kit

Cell Meter™ Viability Test Kit *Red Fluorescence*HPLC≥98%T25培養瓶VOPP1/ECOP/GASP ELISA kit

Cell Meter™ Viability Test Kit *Green/Red Dual Fluorescence*HPLC≥98%T25培養瓶sorting nexin 3,SNX3 ELISA kit

Cell Meter™ Phosphatidylserine Apoptosis Assay Kit *Blue Fluorescence*HPLC≥98%T25培養瓶coupling factor 6,CF6 ELISA Kit

Cell Meter™ Phosphatidylserine Apoptosis Assay Kit *Green Fluorescence*HPLC≥98%T25培養瓶Calf intestinal alkaline phosphatase,CIAP ELISA Kit
A549, 人肺癌細胞系說明書基本特性：
（1）組織來源于正常大鼠大動脈組織。
（2）鑒定：肌動蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
（3）原代細胞培養末期液氮凍存。
（4）每凍存管細胞數：>5×105 cells/1ml。
（5）肌動蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗證。
（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
培養操作：
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。      
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。  
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取