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詳細介紹
商品介紹：
熒光染料PKH26 是一種可對活細胞進行熒光標記的新型染料，可以標記活體細胞，通過與膜結構的脂質分子結合而標記細胞。對細胞毒性較小，熒光背景低，脂溶性高，能夠輕易穿透細胞膜，有著強而穩(wěn)定的紅色熒光。 在細胞分裂增殖過程中，PKH26的熒光強度會隨著細胞的分裂而逐級遞減，標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，因此其熒光強度是親代細胞的一半，根據(jù)這一特性，它可被用于檢測細胞增殖，細胞周期的估算及細胞分裂等方面。PKH26標記細胞的熒光非常均一，并且分裂后的子代細胞的熒光分配也更均一。在細胞分裂增殖過程中，PKH26標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，熒光強度變?yōu)橛H代細胞的一半，通過流式細胞儀根據(jù)熒光強度的不同，可檢測出未分裂細胞，分裂一次(1/2的熒光強度)，二次(1/4的熒光強度)，三次(1/8的熒光強度)，以及更多分裂次數(shù)的細胞。PKH26可檢測分裂次數(shù)多達六次甚至更多。經(jīng)PKH26標記的細胞可用于體外和體內增殖研究，且具有不會使鄰近細胞染色的功能。 PKH26標記的細胞用于體內觀察可以長達數(shù)周之久，它常被用來做活體細胞檢測實驗和用熒光電鏡觀察細胞長期活動的實驗。PKH26 毒性較小，不影響細胞的增殖能力。此方法操作簡單，且不用放射性同位素，不存在安全隱患。可以更快速，更準確和更安全地得到想要的實驗數(shù)據(jù)。 PKH26標記細胞后通常用流式細胞儀進行細胞增殖檢測。 PKH26標記細胞呈紅色熒光，熒光波長：λex=551 nm,λem=567 nm。 儲存條件：-20℃避光保存。 有效期：一年。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
500T | 1～3天 |
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
阿扎那韋（標準品）英文名稱： Moxifloxacin Hydrochloride7號染色體開放閱讀框25抗體包裝1g
阿扎那韋硫鹽(標準品)英文名稱： Moxifloxacin HydrochlorideCOG1蛋白抗體包裝25g
艾地醌(標準品)英文名稱： Salmeterol xinafoate過敏C3受體/補體C3受體抗體包裝5g
愛普列特（標準品）英文名稱： NaproxenCD3抗體包裝1g
安倍生坦(標準品)英文名稱： NaproxenCP2相關轉錄抑制因子1抗體包裝5g
安乃(標準品）英文名稱： Prednisone電壓依賴型N型鈣通道α1B抗體包裝1g
（標準品）英文名稱： Prednisone煙堿型乙酰受體A2(神經(jīng)型)抗體包裝5g
蝶啶（標準品）英文名稱： Doxycycline monohydrate/Doxycycline baseC型凝集結構域家族1成員A抗體包裝25g
砜(標準品)英文名稱： Zoledronic acid hydrateγ干擾誘導單核因子抗體包裝5g
芐西林/芐青霉(標準品)英文名稱： Zoledronic acid hydrate血小板因子4抗體包裝1g
芐西林鈉(標準品)英文名稱： Pamidronate Disodium血小板趨化因子7蛋白抗體包裝250mg
丁三（標準品）英文名稱： Pamidronate Disodium干擾誘導T趨化因子抗體包裝5g
芬鈉(標準品)英文名稱： Gentamicin sulfate B-淋巴趨化因子抗體包裝100g
基比林（標準品）英文名稱： Gentamicin sulfate 凋亡加強結構域蛋白12抗體包裝25g
基己（標準品）英文名稱： Cefuroxime Sodium 凋亡加強結構域蛋白14抗體包裝5g
黑曲霉Aspergillus│niger 質量規(guī)格：>97.0%,BR血管生長試劑盒α-香附;α-Cyperone
ATCC15173＝CCUG407＝CIP7715＝DSM30026＝ICPB4221＝IFO15125＝JCM5490＝LMG1231＝NCTC8582＝AS1.1800資源名稱: 木糖氧化產(chǎn)堿菌反硝化亞種 質量規(guī)格：HPLC≥99%，標準品血管內皮抑抗體試劑盒異烏藥內酯;linderalactone
南方鹽單胞菌Halomonas│meridiana 質量規(guī)格：含量>99.0%血管內皮粘附分子1試劑盒新藤黃;neogambogic aci
PKH26細胞增殖與毒性檢測試劑盒霍氏腸桿 L-天冬氨酸-4-芐酯糖脂抗體Elisa
尖孢鐮刀 五氯吡啶胞裂蛋白9Elisa
釀酒酵母 5-溴-2-氯牛痘病IgMElisa
哈茨木霉 衣康酸酐唾液睪酮Elisa
綠色木霉 4-甲氧基-2-氧代-1,2-二氫-3-基吡啶D-絲氨酸Elisa
球孢白僵 1,10-二氯癸烷趨化因子20Elisa
金灰青霉 2-氯-5-羥甲基吡啶趨化因子28Elisa
毛木耳 2,3,4-三羥基苯甲空泡相關蛋白A抗體Elisa
金龜子綠僵 5-氯-2-羥基-3-硝基吡啶腦膜炎奈瑟氏Elisa
死亡谷芽孢桿 2',3'-O-異叉肌苷髓過氧化物Elisa
傳染性法氏囊病病 鄰氯三氯甲苯卡介苗抗體Elisa
慢生根瘤 草酸鈮(V)酪氨酸Elisa
堅強芽孢桿 2-乙氧基苯酸過氧化氫Elisa
雞傷寒沙門氏 3-氯-2-氟苯β氨基己糖苷AElisa
嗜果刀孢 4-溴-2-氟類缺陷病Elisa
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