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胰蛋白酶-EDTA(含100mL酶解緩沖液)說明書

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更新時間:2019-08-01 13:08:31瀏覽次數:530

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/瓶
貨號 GOY-X0537 應用領域 化工
主要用途 僅用于科研    
胰蛋白酶-EDTA(含100mL酶解緩沖液)說明書冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

詳細介紹

產品名稱:胰蛋白酶-EDTA(含100mL酶解緩沖液)說明書
英文名稱:#NAME?
規格:5×105cells/瓶
產品貨號:GOY-X0537
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胰蛋白酶-EDTA(含100mL酶解緩沖液)說明書

#NAME?

5×105cells/瓶

細胞培養的優點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
細胞培養操作規程:
主要功能:
(1)血管平滑肌細胞的再生能力是原發血管病變的重要因素。
(2)表達鈣通道及ICAM-1和VCAM-1,參與血管壁的炎癥反應。
(3)與血管疾病的進展和穩定有關。
胰蛋白酶-EDTA(含100mL酶解緩沖液)說明書生理變化:
(1)主動脈硬化。
(2)主動脈瘤
(3)主動脈鈣化。
110241-19-596T著絲粒蛋白I(CENPI)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

86377-52-896T免疫球蛋白G4(IgG4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

294674-09-296T補體1抑制因子(C1INH)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

149507-55-196T前列腺素F受體(FP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

508182-41-096T前列腺素E受體2(EP2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

112430-64-596T載脂蛋白C1(APOC1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

98665-21-596T麥芽糖酶糖化酶(MGA)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

120462-47-796TⅡ型前膠原羧基端原肽(PⅡCP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
芳樟醇

4-硝基苯硫酚

4-硝基苯硫酚

硝鉑溶液

2-氟-3-(三氟甲基)苯甲基溴

4-氟-3-三氟甲基溴芐

4-氟-3-三氟甲基溴芐

3-氟-5-(三氟甲基)苯甲醇

3-氟-5-(三氟甲基)苯甲醇

2--4-煙甲酯
基本特性:
(1)組織來源于正常大鼠大動脈組織。
(2)鑒定:肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
(3)原代細胞培養末期液氮凍存。
(4)每凍存管細胞數:>5×105 cells/1ml。
(5)肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗證。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
培養操作:
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。      
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。  
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取

 

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