詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
500ml | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
用途: 溫和脫鈣液,組織脫鈣,尤其適用于免疫組化 注意事項: 固定后對細胞核和細胞漿細微結構著色好。 儲存條件:室溫,12個月 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
油(標準品)英文名稱: Glycochenodeoxycholic Acid Sodium Salt微管驅動蛋白家族成員1A抗體包裝1g
隔山消(標準品)英文名稱: BGJ398(NVP-BGJ398)離子通道蛋白家族成員1抗體包裝25g
根皮苷(標準品)英文名稱: BMN673離子通道蛋白家族成員1樣蛋白抗體包裝5g
根皮(標準品)英文名稱: Staurosporine離子通道蛋白家族成員2抗體包裝10g
功勞木(標準品)英文名稱: Oxacillin sodiumG蛋白激活內向通道5抗體包裝50g
鉤藤(鉤藤)(標準品)英文名稱: Oxacillin sodium離子通道多聚體結構域蛋白12抗體包裝1g
鉤藤堿(標準品)英文名稱: (±)-α-Tocopherol nicotinate抑癌蛋白EZH2抗體包裝25g
鉤吻(標準品)英文名稱: Fluorescein-5-maleimideDNA修復Ku70抗體包裝5g
鉤吻子(標準品)英文名稱: Veliparib (ABT888)DNA修復Ku-80抗體包裝100g
狗脊(標準品)英文名稱: Nafcillin sodium salt monohydrate14號染色體開放閱讀框106抗體包裝25g
枸杞子(標準品)英文名稱: Nafcillin sodium salt monohydrate腦蛋白9抗體包裝5g
枸櫞血根堿英文名稱: Atosiban Acetate通道相互作用蛋白2抗體包裝100g
構骨葉(標準品)英文名稱: Trelagliptin free base劍蛋白p60亞基A1抗體包裝25g
構樹堿A(標準品)英文名稱: Cefotaxime SodiumKazrin蛋白抗體包裝5g
古倫賓(標準品)英文名稱: Cefotaxime Sodium離子通道多聚體結構域蛋白8抗體包裝1g
辣椒疫霉Phytophthora│capsici Leonian 質量規格:>98%,BR抗信號識別顆粒54kDa蛋白試劑盒狗牙花堿D乙;Coronarin D
小孢根霉華變種Rhizopus│microsporus var. chinensis 質量規格:>98.5%,BR,可用于培養抗心磷脂抗體IgM試劑盒狗牙花堿D;Coronarin D
鹽田菌Salinicola│sp. 質量規格:>99%,BR抗心磷脂抗體IgG試劑盒高車前;hispidulin
Perenyi's脫鈣液松鼠葡萄球 4-溴芐脒鹽酸鹽百香果木質化病Elisa
Pseudomonas batumici 3-羥基吡-2-酰葡萄糖氧化Elisa
少孢哈薩克斯坦酵母 1-(3-吡啶基)-3-(二甲氨基)-2-烯-1-酮泛化蛋白Elisa
玫煙色棒束孢 3,4-二氫-2(1H)-喹啉酮木葡聚糖內轉糖苷Elisa
Bacillus sp. 3-甲氧基-2-甲酸抗性淀粉Elisa
海假交替單胞 3-氨基異煙酸甲酯抗超氧陰離子Elisa
多主葡萄殼 原卟啉二甲酯磷脂酸磷酸Elisa
芽胞桿 6-甲基吡-2-羧酸泛激活E3Elisa
多粘類芽孢桿 1,2,3,4-四氟苯延胡索酸Elisa
金黃色葡萄球金黃亞種 3-(2,4-二)酸鯊烯-2,3-環氧化物Elisa
釀酒酵母 4-甲基哌-1-甲酰氯鹽酸鹽O-乙酰絲氨酸硫水解Elisa
枯草芽孢桿 甘油磷酸酯二鈉鹽水合物(異構體混合物)T4多聚核苷酸激Elisa
雞新城疫病血凝抑制試驗(HI)陽性血清 2-乙基-3,5(或3,6)-二甲基吡脂氧合Elisa
黑曲霉 環基色P450氧化還原Elisa
黃桿 L-脯氨酸叔丁酯鹽酸鹽色P450氧化還原Elisa