商品介紹:
蘇(HE)是從熱帶豆科植物蘇木的干枝中提取的一種色素,是組織化學(xué)和免疫組織化學(xué)中常用的染料之一。蘇不能直接染色,必須暴露在空氣中變成氧化蘇(又叫蘇木素)-成熟后才能使用。蘇的成熟過(guò)程需時(shí)較長(zhǎng),配制后時(shí)間愈久,染色力愈強(qiáng)。采用蘇木素染色液進(jìn)行免疫染色后的復(fù)染,操作步驟簡(jiǎn)便,操作時(shí)間短。可以廣泛用于組織切片或培養(yǎng)細(xì)胞的染色,或與免疫組織化學(xué)、免疫細(xì)胞化學(xué)、免疫熒光、原位雜交等配合使用。使用蘇木素染色試劑盒,染色后可以進(jìn)行免疫染色或其它染料的復(fù)染。蘇木素染色后的細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色,細(xì)胞漿呈現(xiàn)粉紅色或紅色。 儲(chǔ)存條件:常溫保存,有效期至少一年。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
蘇木素染色液(Gill法) | Hematoxylin Staining Solution | 15mL | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
羥基脲(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sulforhodamine B白喉酰生物合成樣蛋白2抗體包裝25g
羥煙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sulforhodamine BNotch信號(hào)通路Delta樣配體3抗體包裝5g
羥(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rhodamine 110 chloride動(dòng)力蛋白激活蛋白2抗體包裝1g
草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rhodamine 123視神經(jīng)相關(guān)蛋白/早老結(jié)合蛋白抗體包裝25g
青霉G(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Trimebutine baseDHX螺旋抗體包裝5g
琥珀單酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 6-Carboxytetramethylrhodamine轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白DISP2抗體包裝10g
琥珀鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 6-TAMRA, SE DNA聚合α2抗體包裝50g
氫醌(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ovalbumin/Egg albumins短鏈脫氫/還原家族7B抗體包裝100g
氫噻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Miltefosine膜二肽3抗體包裝25g
氫達(dá)非那新(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Miltefosine雙特異性磷13抗體包裝500g
氫后馬托品(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1-Naphthyl PP1DIM-7蛋白抗體包裝1g
氫加蘭他敏(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Aliskiren hemifumarate核糖核Dicer抗體包裝25g
氫力克拉敏(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Epothilone D內(nèi)皮和平滑肌衍生的神經(jīng)纖毛蛋白抗體包裝5g
氫右美沙芬(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Calcium levofolinate含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族2抗體包裝100ml
氫樟柳堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Afatinib dimaleate /BIBW2992-MA2DNA連接1抗體包裝500ml
草本枝孢Cladosporium│herbarum 質(zhì)量規(guī)格:≥99%,BR蝸牛同源物2試劑盒石松靈堿;Lycodoline
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品蝸牛同源物1試劑盒山羊豆堿;Galegine
節(jié)桿菌屬Arthrobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格:≥98.5%,BR胃粘膜相關(guān)淋巴樣組織淋巴瘤抗體試劑盒藤子酚;Embelin
蘇木素染色液(Gill法)海洋沉積物芽孢桿 2-乙基咪唑錯(cuò)配修復(fù)蛋白3基因Elisa
漢遜德巴利酵母漢遜變種 4-甲基芐抗淋病奈瑟氏抗體Elisa
匍枝根霉(黑根霉) 乙酸苯乙酯氧化三Elisa
天門冬紫色鏈霉 氨氯地平RNA氧化標(biāo)志物8-羥基鳥苷Elisa
褐孢霉* 8-氨基辛酸乙酰乙酸Elisa
皺褶假絲酵母 檸檬酸銅磷酸二酯4Elisa
芽孢桿屬 3-[2-(Boc-氨基)乙基]氮雜環(huán)丁烷鹽酸鹽大腸桿0157Elisa
嗜熱脂肪地芽孢桿 3-Boc-氨甲基氮雜環(huán)丁烷鹽酸鹽硫酸酚Elisa
大腸桿 1-高哌羧酸芐酯對(duì)甲酚Elisa
石蠟節(jié)桿 1H-吡唑基[3,4-B]吡啶-3-羧酸酮Elisa
蜂房哈夫尼 1-羥基-1-環(huán)已酸乙酯網(wǎng)鈣蛋白3Elisa
釀酒酵母 N-Boc-3-溴-氮雜環(huán)丁烷髓磷脂轉(zhuǎn)錄因子1Elisa
卷曲乳桿* 間苯甲酰檢查點(diǎn)蛋白激1Elisa
枯草芽孢桿 3,4-二甲基芐超敏肌鈣蛋白TElisa
直立共養(yǎng)單胞 乙酸十二烷基酯沉默調(diào)節(jié)蛋白3Elisa