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PBMC樣本密度分離液

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更新時間:2022-04-21 14:30:41瀏覽次數:214

聯系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

產品簡介

供貨周期 現貨 規格 200ml
貨號 GOY-01X9755 應用領域 化工
主要用途 公司產品僅供科研    
PBMC樣本密度分離液公司正在出售的產品:LY-96/MD-2 MD-2蛋白抗體鈉 98%
Lysozyme 溶菌抗體硫代甜菜 12 98%
Lyn 膜相關蛋白酪氨激Lyn抗體十二烷硫鈉 97%,電泳
Phospho-Lyn (Tyr507) 膜相關蛋白酪氨激Lyn抗體十二烷硫鈉 99.0%,超純級
Phospho-Lyn (Tyr396) 化膜相關蛋白酪氨激Lyn抗體硫代甜菜 8 98

詳細介紹

商品介紹:

本產品是葡聚糖Ficoll 400與泛影酸葡甲胺按照一定比例混合的無菌水溶液,適用于從人外周血液中分離淋巴細胞。根據細胞密度的差異,采用密度梯度沉降法,借助細胞分離液和離心技術,就可以進行淋巴細胞分離純化。

保存溫度:18-25℃避光

應用:

外周血單個核細胞(PBMC)的分離

產品特性:

GMP級環境

無細胞毒性,細胞得率高

活力更好

批次差異極小

以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:

中文名稱

英文名稱

產品規格

發貨周期

PBMC樣本密度分離液


200ml

1~3天


操作步驟:

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。

2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測:

染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。

建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。

2) 熒光顯微鏡檢測:

染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

美他環,烯土霉(標準品)英文名稱: Amlodipine角蛋白13抗體包裝25g

美托拉宗(標準品)英文名稱: Amlodipine白免疫球蛋白樣受體-B抗體包裝500g

美雄諾龍(標準品)英文名稱: NizatidineCD33L抗體包裝100g

門冬胰島(標準品)英文名稱: Carboxymethyl cellulose 角蛋白10抗體包裝25g

蒙脫石(標準品)英文名稱: Fludarabine軸突生長因子CD108抗體包裝5g

孟魯司特鈉(標準品)英文名稱: Fludarabine唾液結合性免疫球蛋白樣凝集5抗體包裝1g

咪喹莫特(標準品)英文名稱: G-418 disulfate,GeneticinCD329抗體包裝1g

咪唑(標準品)英文名稱: Erlotinib嗜粒趨化蛋白14抗體包裝1g

咪唑煙(標準品)英文名稱: N-Acetyl-cysteine1號染色體開放閱讀框57抗體包裝250mg

米格列(標準品)英文名稱: Zopiclone2號染色體開放閱讀框18抗體包裝100ml

米格列奈鈣(標準品)英文名稱: Zopiclone色c氧化6抗體包裝100g

米力農(標準品)英文名稱: Aniracetam嗜粒趨化蛋白24抗體包裝25g

米諾地爾(硫鹽)敏樂啶(標準品)英文名稱: Aniracetam巨噬炎性蛋白15包裝100ml

米屈肼(標準品)英文名稱: L-Glutamine巨噬炎性蛋白抗體包裝500ml

米替福新(標準品)英文名稱: RoflumilastCD72蛋白抗體包裝1g

擬青霉屬Paecilomyces│sp. 質量規格:>720IU/MG,BR膜DNA抗體試劑盒1-脫氧野尻霉;1-Deoxynoji

醋化醋桿菌Acetobacter│aceti 質量規格:效價測定角蛋白21-1片段試劑盒他克莫司;Tacrolimus

肺炎克雷伯氏菌Klebsiella│pneumoniae 質量規格:EP/USP角蛋白18-M65試劑盒10-脫乙酰基巴卡丁III;10-Dea
PBMC樣本密度分離液飼料   硬脂酸鈷風疹病IgM抗體Elisa

南方散斑殼 啉鹽酸鹽抗組織轉谷氨酰IgG抗體Elisa

枯草芽孢桿 1,3,4,6-四-O-乙酰基-2-脫氧-2-苯二甲酰亞氨基-β-D-吡喃葡萄糖抗組織轉谷氨酰IgM抗體Elisa

異常漢遜酵母異常變種 氮雜環丁烷-3-甲酸甲酯鹽酸鹽糖原磷酸化aElisa

冠突散囊 1,4-二異基苯硫氧還蛋白氧化還原Elisa

大腸埃希氏 三氟乙酰賴氨酸骨硬化蛋白Elisa

赤曲霉 乙烯基雙茚基二氯化鋯, 外消旋混合物肌特異性增強因子2D抗體Elisa

橢圓孫秀芹氏 3-氨基-5-苯基噻吩-2-甲酸甲酯活化轉錄因子3Elisa

雙胞雙鐮孢 氧化白藜蘆半胱氨酸蛋白1Elisa

桃色枝頂孢 扁豆堿卡格氏病Elisa

松針散斑殼 L-谷氨酸 1-甲酯麥角蛋白IgG抗體Elisa

同絲毛殼 白皮杉水痘-帶狀皰疹病IgA抗體Elisa

釀酒酵母 白藜蘆抗組織轉谷氨酰IgA抗體Elisa

貴州青霉 美曲勃龍(R-1881)糖原磷酸化Elisa

考克氏屬 尼泊金異酯α半乳糖苷Elisa

 


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