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詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
| Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit | 20次|50次 | 1～3天 |
商品介紹：
本試劑盒是用FITC標記的重組人Annexin V來檢測細胞凋亡時出現在細胞膜表面的磷脂酰絲氨酸的一種細胞凋亡檢測試劑盒。可以使用流式細胞儀、熒光顯微鏡或其它熒光檢測設備進行檢測。一個包裝的本試劑盒共可以檢測20個細胞樣品。 試劑盒組份： Annexin V-FITC——————100μl Annexin V-FITC結合液———12ml 碘化丙啶染色液——————220μl Annexin是一類廣泛分布于真核細胞細胞漿內鈣離子依賴的磷脂結合蛋白，參與細胞內的信號轉導。但僅Annexin V被報道可以調控一些PKC的活性。 Annexin V選擇性結合磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserine，簡稱PS)。磷脂酰絲氨酸主要分布在細胞膜內側，即與細胞漿相鄰的一側。在細胞發生凋亡的早期，不同類型的細胞都會把磷脂酰絲氨酸外翻到細胞表面，即細胞膜外側。磷脂酰絲氨酸暴露到細胞表面后會促進凝血和炎癥反應。而Annexin V和外翻到細胞表面的磷脂酰絲氨酸結合后可以阻斷磷脂酰絲氨酸的促凝血和促炎癥反應活性。 用帶有綠色熒光的熒光探針FITC標記的Annexin V，即Annexin V-FITC，就可以用流式細胞儀或熒光顯微鏡非常簡單而直接地檢測到磷脂酰絲氨酸的外翻這一細胞凋亡的重要特征。 本試劑盒還提供了碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)染色液，碘化丙啶可以染色壞死細胞或凋亡晚期喪失細胞膜完整性的細胞，呈現紅色熒光。對于壞死細胞，由于細胞膜的完整性已經喪失，Annexin V-FITC可以進入到細胞漿內，與位于細胞膜內側的磷脂酰絲氨酸結合，從而也使壞死細胞呈現綠色熒光。 本試劑盒的流式檢測效果參考圖1和圖2，熒光顯微鏡檢測效果參考圖3。 1.細胞用本試劑盒染色后流式細胞儀檢測細胞凋亡的效果圖。Jurkat細胞未經處理(A)或用10μM喜樹堿(Camptothecin)作用4小時(B)后，用本試劑盒染色，然后用流式細胞儀進行細胞的散射和熒光檢測。從圖中可以看出，經過凋亡誘導劑喜樹堿處理后的細胞，其Annexin V-FITC染色陽性并且PI染色陰性的細胞，即凋亡細胞，明顯增加(B圖的右下象限)，Annexin V-FITC和PI染色雙陽性的細胞，即壞死細胞，也有所增加(B圖的右上象限)。圖中Annexin V-FITC染色陰性PI染色陽性(Annexin V-/PI+)所在象限(A和B圖的左上象限)出現的細胞點是許可范圍內的檢測誤差。實測數據可能會因細胞類型、細胞凋亡情況、檢測儀器等的不同而存在差異，圖中數據僅供參考。 2.細胞用本試劑盒染色后流式細胞儀檢測效果驗證圖。Jurkat細胞用10μM喜樹堿(Camptothecin)作用4小時后，未經染色(A)、僅用本試劑盒中的PI進行染色(B)、僅用本試劑盒中的Annexin V-FITC進行染色(C)、用本試劑盒中的Annexin V-FITC和PI進行雙染(D)。從圖中可以看出，未經染色的是雙陰性細胞(A)，僅PI染色后出現了預期的PI染色陽性的細胞，僅Annexin V-FITC染色出現了預期的Annexin V-FITC染色陽性的細胞，Annexin V-FITC和PI雙染出現了預期的僅Annexin V-FITC染色陽性的凋亡細胞和雙陽性的壞死細胞。出現的非預期的細胞點*在許可的誤差范圍內。實測數據可能會因細胞類型、細胞凋亡情況、檢測儀器等的不同而存在差異，圖中數據僅供參考。 儲存條件：4℃避光，有效期6個月。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
血管生長(ANG)英文名稱：ANG ELISA KitAIMP2抗體包裝25g
血管生成樣蛋白4(ANGPTL4)英文名稱：ANGPTL4 ELISA Kit乙酰膽堿抗體包裝5g
血管生成Ⅱ(ANGⅡ)英文名稱：ANGⅡ ELISA Kit5-基乙酰合1抗體包裝10g
血管生成4(ANG-4)英文名稱：ANG-4 ELISA Kit防御α1/3抗體包裝50g
血管生成2(ANG-2)英文名稱：ANG-2 ELISA KitABC膜轉運蛋白抗體包裝1g
血管生成1(ANG-1)英文名稱：ANG-1 ELISA Kit植物延長蛋白（擬南芥）包裝5g
血管內皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)英文名稱：VCAM-1/CD106 ELISA KitA-Raf抗體包裝1g
血管內皮細胞生長因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)英文名稱：VEGFR-3/Flt-4 ELISA Kit磷化A-Raf抗體包裝1g
血管內皮細胞生長因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)英文名稱：VEGFR-3/Flt-4 ELISA Kit紅腺苷脫3抗體包裝5g
血管內皮細胞生長因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)英文名稱：VEGFR-2/Flk-1 ELISA Kit雄激結合蛋白抗體包裝10g
血管內皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)英文名稱：VEGFR-1/Flt1 ELISA Kit肝再生增強因子抗體包裝50g
血管內皮細胞生長因子D(VEGF-D)英文名稱：VEGF-D ELISA KitAPP/ABPP淀粉樣肽前體蛋白抗體包裝25g
血管內皮細胞生長因子C(VEGF-C)英文名稱：VEGF-C ELISA Kit胎蛋白單克抗體（包被）包裝5g
血管內皮細胞生長因子B(VEGF-B)英文名稱：VEGF-B ELISA Kit胎蛋白單克抗體(檢測)包裝1g
血管內皮細胞生長因子(VEGF)英文名稱：VEGF ELISA KitADP核糖基化因子結合蛋白1抗體包裝250mg
粘附分子IgG樣結構域蛋白2抗體白介4(IL4)KU-55933 (ATM Kinase Inhibitor) is a potent and specific ATM inhibitor with IC50
Annexin V-FITC細胞凋亡檢測試劑盒梨形卷枝霉 N-Boc-4-甲酸乙酯IκB激酶-α檢測試劑盒
假絲酵母屬 4-溴-2-氟三氟甲苯IκB激酶-β檢測試劑盒
鼠李糖小短桿 N,N,N-基乙二I型膠原蛋白檢測試劑盒
釀酒酵母 2-溴-4-氟甲苯I型膠原羥基端肽β降解產物檢測試劑盒
分枝桿 3,5-二叔丁基-4-羥基I型原膠原N端前肽檢測試劑盒
蒙古口蘑 2,5-二氟-4-硝苯Jo1抗體;抗組氨酰tRNA合成酶抗體檢測試劑盒
產氣莢膜梭 素C型 3,6-二氯噠KIT Ligand檢測試劑盒
鏈霉 馬來酸二乙酯Klotho蛋白檢測試劑盒
凍土毛霉 丁二酸二丁酯Klotho蛋白檢測試劑盒
樟疫霉 1-氯甲基-4-氟-1,4-二氮雜雙環[2.2.2]辛烷二(四氟酸)鹽L1粘附分子檢測試劑盒
印度芽孢桿 對氯苯乙Laminin-5;Epiligrin檢測試劑盒
釀酒酵母 醋硝唑L-精氨酸檢測試劑盒
斑玉蕈 乙酸-4-酚酯L-乳酸檢測試劑盒
木蹄層孔 乙酰酮氧鈦(IV)L選擇素檢測試劑盒
枯草芽孢桿枯草亞種 4-氟-3-酸Mac-2結合蛋白檢測試劑盒
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