以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
微管聚合抑制劑 | Vincristine sulfate | 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg | 1~3天 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
英文名稱(chēng):Vincristine sulfate 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg Vincristine sulfate是一種微管聚合抑制劑,能夠與微管蛋白結(jié)合,IC50值為32μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):2068-78-2 別名:Leurocristine sulfate;22-Oxovincaleukoblastine sulfate 純度:99.51% 分子量:923.04 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀(guān)察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀(guān)察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
大腸埃希菌DDX58抗體Human TCF4(Transcription factor 4) ELISA Kit人補(bǔ)體因子H(CFH)免疫試劑盒
(鐮刀菌)DG4DDX4抗體Human PLD1(Phospholipase D1) ELISA Kit人補(bǔ)體因子B前體(pre-CFB)免疫試劑盒
蟲(chóng)草屬鴨瘟病DPV抗體Human YRDC (YrdC domain-containing protein, mitochondrial) ELISA KIT人補(bǔ)體片斷5b(C5b)免疫試劑盒
長(zhǎng)雙歧桿菌交聯(lián)纖維蛋白二聚體抗體Human ITIH5L(Inter-alpha-trypsin inhibitor heavy chain H5-like protein) ELISA Kit人補(bǔ)體片斷5a(C5a)免疫試劑盒
干草鞘單胞菌腦發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白抗體Human S100A4(Protein S100-A4) ELISA Kit人補(bǔ)體片斷4b(C4b)免疫試劑盒
豬丹絲菌DNA斷裂因子抗體(蛋白激活脫氧核糖核)Human GCLC(Glutamate-cysteine ligase catalytic subunit) ELISA Kit人補(bǔ)體片斷3b(C3b)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌脫氧核糖核γ抗體Human MSRA(Mitochondrial peptide methionine sulfoxide reductase) ELISA Kit人補(bǔ)體片斷3a(C3a)免疫試劑盒
香菇死亡相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子1抗體Human COL4A3BP(Collagen type IV alpha-3-binding protein) ELISA Kit人補(bǔ)體片段4d(C4d)免疫試劑盒
紅栓菌脫氧核糖核1抗體Human TYRO3 (Tyrosine-protein kinase receptor TYRO3) ELISA KIT人補(bǔ)體片段3d(C3d)免疫試劑盒
假黃色桿菌屬脫氧核糖核2抗體Human VMAC (Vimentin-type intermediate filament-associated coiled-coil protein) ELISA KIT人補(bǔ)體片段3c(C3c)免疫試劑盒
雜色曲霉死亡防衛(wèi)蛋白1抗體Human TYRP1 (5,6-dihydroxyindole-2-carboxylic acid oxidase) ELISA KIT人補(bǔ)體片段3b受體(C3bR)免疫試劑盒
盧森坦類(lèi)諾卡氏菌Duffy血型趨化因子受體抗體Human FAM20B(Glycosaminoglycan xylosylkinase) ELISA Kit人補(bǔ)體蛋白9(C9)免疫試劑盒
解淀粉芽孢桿菌DEK癌基因結(jié)合蛋白Human BTN2A1(Butyrophilin subfamily 2 member A1) ELISA Kit人補(bǔ)體蛋白5(C5)免疫試劑盒
釀酒酵母PSD95結(jié)合蛋白1抗體Human HMGB2(High mobility group protein B2) ELISA Kit人補(bǔ)體蛋白4(C4)免疫試劑盒
熱帶假絲酵母PSD95結(jié)合蛋白2抗體Human HMGA1(High mobility group protein HMG-I/HMG-Y) ELISA Kit人補(bǔ)體蛋白3(C3)免疫試劑盒
ChryseobacteriumPSD95結(jié)合蛋白4抗體Human MGP(Matrix Gla protein) ELISA Kit人補(bǔ)體C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白1(C1QTNF1/CTRP1)免疫試劑盒
: HBUM81033資源名稱(chēng): 鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.8%桔皮
IFO12550ATCC12980BGSC9A20CCM2062BCRC(formerlyCCRC)11092CCUG26241CIP66.23DSM22IAM11062JCM2501KCTC1665KCTC1752LMG6939NCCB75019NCIMB8923(formerlyNCDO1768)NCTC10339NRRLB-1172VKMB-510資源名稱(chēng): 嗜熱脂肪地芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品塔拉薩敏
金針菇Flammulina│velutipes var. velutipes (Curtis) Singer 質(zhì)量規(guī)格:大豆皂苷Bb
微管聚合抑制劑小白菇 N-芐基托品酮色氨酸羥化Elisa
啤酒酵母 7-甲基-1,5-苯并二氧雜環(huán)庚烷-3-酮環(huán)氧二十碳三烯酸Elisa
雜色曲霉 2--5-苯甲二羥二十碳三烯酸Elisa
灰葡萄孢(灰霉病) 2--6-甲基-3-吡啶甲卵泡受體Elisa
嗜熱鏈球 L-天冬氨酸雙芐酯對(duì)甲苯磺酸鹽鑰孔蟲(chóng)戚血藍(lán)蛋白IgG抗體Elisa
Deinococcus 噁唑鑰孔蟲(chóng)戚血藍(lán)蛋白IgM抗體Elisa
產(chǎn)黃青霉 5-甲氧基-2-甲基-3-乙酸蛋白激R樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激Elisa
魯氏接合酵母 4-溴-2-羥基苯金屬轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1Elisa
蘋(píng)果鏈格孢 S-乙酰半胱氨酸鹽酸蛋氨酸腦啡肽Elisa
大腸埃希 十氫化萘-d18內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白a1Elisa
草酸青霉 N,N,N,N,-四環(huán)氧基-4,4-二氨基二苯微粒體甘油三酸酯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Elisa
反硝化鹽單胞 1-萘乙酸甲酯組H1受體Elisa
山茶 磷酸二氫銨-15N速激肽1Elisa
杭州弧 二-μ-雙[5--2-[(4-)(肟基)甲基]苯基]鈀(II)二聚體成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體Elisa
赫黃核鏈霉 戊二酰天冬酰內(nèi)肽Elisa