詳細(xì)介紹
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
mIgA表面膜免疫球蛋白AELISA Kit | mIgA ELISA Kit | GOY-E99641 |
檢測(cè)目的:用于檢測(cè)血漿,血清及相關(guān)液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本.
檢測(cè)種屬:大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、等動(dòng)植物。
具有如下優(yōu)點(diǎn):
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
五、性價(jià)比非常好,節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
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性能:
1) 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
2) 靈敏度:檢測(cè)濃度小于1.0 pg/ml。
3)特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4) 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
5) 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6) 有效期:6個(gè)月
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
2.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
3.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔di一孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
5.底物請(qǐng)避光保存。
6.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
8.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。
雞血小板反應(yīng)蛋白2(TSP-2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
雞天青殺素1(AZU1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
雞白介素3介導(dǎo)核因子(NFIL3)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
雞性別決定區(qū)Y框蛋白2(SOX2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
雞胃蛋白酶原C(PGC)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
雞谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶θ1(GSTθ1/GSTt1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
雞補(bǔ)體因子I(CFI)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
雞半乳糖6硫酸酯酶(Gal-6S)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
雞蛋白(NPHN)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
雞補(bǔ)體成分4a(C4a)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
雞特異性抗原2(SSFA2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
雞早期生長(zhǎng)應(yīng)答蛋白1(EGR1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
雞凝血因子V(F5)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
雞磷脂酶C(PLC)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
mIgA表面膜免疫球蛋白AELISA KitCRF/CRH 促上皮質(zhì)激素釋放因子抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-horse IgG/PE PE標(biāo)記的兔抗馬IgG 規(guī)格: 0.1ml
SYN1 神經(jīng)突觸素1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Tropomyosin 原肌球蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
FAM21C FAM21C蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-human IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml
phospho-P53(Ser6) 磷酸化瘤抑制基因P53抗體 規(guī)格: 0.1ml
LHX6 轉(zhuǎn)錄因子LHX6抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-horse IgM/FITC FITC標(biāo)記的兔抗馬IgM 規(guī)格: 0.1ml
ARSB 芳基硫酸酯酶B抗體 規(guī)格: 0.2ml
IL-23R 白介素-23受體抗體 規(guī)格: 0.2ml
MARCO 巨噬細(xì)胞清道夫受體抗體 規(guī)格: 0.2ml
CYP3A4 細(xì)胞色素P450 3A4抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-horse IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的兔抗馬IgG 規(guī)格: 0.1ml