詳細介紹
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
ColⅣⅣ型膠原ELISA Kit | ColⅣ ELISA Kit | GOY-E99839 |
檢測目的:用于檢測血漿,血清及相關液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細胞培養上清、組織勻漿等標本.
檢測種屬:大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、等動植物。
具有如下優點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩定的重復性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型;
五、性價比非常好,節省實驗經費。
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性能:
1) 準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值,大于等于0.9900。
2) 靈敏度:檢測濃度小于1.0 pg/ml。
3)特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
4) 重復性:板內、板間變異系數均小于15%。
5) 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6) 有效期:6個月
注意事項:
1. 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
2.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
3.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔di一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請乘以總稀釋倍數(×n×5)。
4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
5.底物請避光保存。
6.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
8.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
丙二醛(MDA)酶聯免疫吸附測定試劑盒
白三烯B4(LTB4)酶聯免疫吸附測定試劑盒
雌酮(E1)酶聯免疫吸附測定試劑盒
可替丁(Cotinine)酶聯免疫吸附測定試劑盒
甲酰甲硫氨酸(fMet)酶聯免疫吸附測定試劑盒
雌二醇(E2)酶聯免疫吸附測定試劑盒
前列腺素D2(PGD2)酶聯免疫吸附測定試劑盒
P物質(SP)酶聯免疫吸附測定試劑盒
雄烯二酮(ASD)酶聯免疫吸附測定試劑盒
肌肽(Car)酶聯免疫吸附測定試劑盒
醛固酮(ALD)酶聯免疫吸附測定試劑盒
睪酮(T)酶聯免疫吸附測定試劑盒
肌鈣蛋白I(TNI)檢測試劑盒
ColⅣⅣ型膠原ELISA KitCSMD2 CSMD2蛋白抗體 規格: 0.2ml
Os05g0477200 protein 水稻白葉枯病菌Os05g0477200蛋白抗體 規格: 1ml
His tag 聚組氨酸抗體標簽抗體 規格: 0.1ml
Dishevelled 3/DVL3 DVL3蛋白抗體 規格: 0.2mlAlpha casein α酪蛋白抗體 規格: 0.2ml
SM22 Alpha 細胞骨架相關蛋白抗體 規格: 0.2mlphospho-CREM (Ser271 +Ser 274) 磷酸化環磷酸苷反應元件調節蛋白抗體 規格: 0.1ml
CD82/KAI1 瘤轉移抑制蛋白1抗體 規格: 0.1mlMPS1/TTK 單極紡錘體蛋白激酶1抗體 規格: 0.2ml
Rabbit anti-mouse Kappa light chain/APC APC標記的兔抗小鼠k鏈 規格: 0.1mlHistone H3 (Tri Methyl K4) *基化組蛋白H3抗體 0.1ml
VEGFR3 管內皮細胞生因子受體3抗體 規格: 0.1mlABAT γ氨基丁酸轉氨酶抗體 規格: 0.2ml
SISP1/GI24 應激誘導分泌蛋白1抗體 規格: 0.2mlPMS1 瘤錯配修復基因PMS1抗體 規格: 0.1ml
CEACAM16/CEAL2 胚抗原相關細胞粘附分子16抗體 規格: 0.2mlBTF/BCLAF1 Bcl2相關轉錄因子抗體 規格: 0.2ml
IL-17E/IL-25 白介素-17E抗體 規格: 0.1mlGCP-2 粒細胞趨化蛋白2抗體 規格: 0.1ml
Defensin β2 防御素β2抗體 規格: 0.1mlNEK2 中心體相關蛋白激酶Nek2抗體 規格: 0.2ml
AFP 甲胎蛋白AFP抗體 規格: 0.1mlRanBP3 RAN結合蛋白3抗體 規格: 0.2ml
Mouse Anti-Bov IgG/FITC FITC標記的小鼠抗牛IgG 規格: 0.3mlphospho-P53(Ser15) 磷酸化瘤抑制基因P53抗體 規格: 0.1ml