詳細介紹
商品介紹:
MTS細胞增殖與毒性檢測試劑盒是應用新型的水溶性甲臢化合物[3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧甲酯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑(金翁),內鹽;MTS]快速高靈敏度檢測細胞增殖和細胞毒性的比色檢測產品。 MTS被細胞生物還原成一種可溶于組織培養基的甲臢化合物,新陳代謝活躍的活細胞內的脫氫酶類將MTS轉化成液態可溶的甲臢化合物,這種甲臢化合物在490nm的吸收值可以直接在96孔板上測量,而不需要另外作處理。由490nm測量的吸收值所表示的甲臢產物的數量與培養物中活性細胞的數量成正比。細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺。對于同樣的細胞,顏色的深淺和細胞數量呈線性關系。 MTS溶液可以直接加入到細胞樣品中,不需要預配各種成分,MTS溶液很穩定,對細胞沒有毒性,可以長時間孵育細胞。MTS法測定細胞增殖或毒性試驗中活細胞數目的靈敏度高,無放射性,檢測細胞增殖實驗的靈敏度比其它方法如MTT,XTT和WST-1高。 儲存條件:2-8℃避光保存。長期不用的分裝后于-20℃避光保存,避免反復凍融。 有效期:一年。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
250T|500T|1000T | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
Finasteride(標準品)英文名稱: Torasemide豬瘟病抗體包裝1g
Fludrocortisone acetate(標準品...英文名稱: Travoprost嗜鉻粒蛋白C抗體包裝5g
Flumethasone(標準品)英文名稱: Trazodone HCl煙堿型乙酰受體α10/AChRα10抗體包裝5g
Fluocinolone Acetonide(標準品)英文名稱: Trazodone HCl煙堿型乙酰受體α6/AChRα6抗體包裝5MG
Fluorometholone(標準品)英文名稱: Trilostane煙堿型乙酰受體α9/AChRα9抗體包裝1g
Fluticasone Propionate(標準品)英文名稱: Trilostane煙堿型乙酰受體δ/AChRδ抗體包裝5g
Gefitinib(標準品)英文名稱: Triptorelin Acetate凋亡加強結構域蛋白8抗體包裝1g
Gemcitabine HCl(標準品)英文名稱: Vancomycin HCl凋亡加強結構域蛋白7抗體包裝5g
Gestodene(標準品)英文名稱: Vancomycin HClβ衣被蛋白抗體包裝100mg
Hexestrol(標準品)英文名稱: Vandetanib 半胱蛋白4/11抗體包裝1g
Hydrocortisone(標準品)英文名稱: Varenicline Tartrate1號染色體開放閱讀框187抗體包裝1g
Hydroxyprogesterone caproat...英文名稱: Varenicline Tartrate9號染色體開放閱讀框61抗體包裝5g
L-(-)-葡萄糖(標準品)英文名稱: Vinorelbine TartrateC末端結合蛋白2抗體包裝25g
L-半胱(標準品)英文名稱: Vinorelbine Tartrate21號染色體開放閱讀框13抗體包裝1g
L-茶(標準品)英文名稱: Voriconazole冠蛋白3抗體包裝250mg
藍灰干酪菌Tyomyces│caesius 質量規格:HPLC>98%,標準品血清淀粉樣蛋白A4試劑盒小檗紅堿硫酯;
舟狀單頂孢Monacrosporium│scaphoides 質量規格:>99%,BR,合物血清淀粉樣蛋白A3試劑盒小檗紅堿;Berberrubine
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格:HPLC>98%,標準品血清淀粉樣蛋白A試劑盒腺嘌呤;Adenine
MTS細胞增殖與毒性檢測試劑盒赭曲霉 3-基-4-異氧基甲酯EB病Rta蛋白Elisa
紙葡萄穗霉 氟米松EB病Rta蛋白Elisa
釀酒酵母 2,3-二氟-4-氧基苯酸異檸檬酸脫氫2Elisa
德氏乳桿保加利亞亞種 5-氯吡-2-甲酰葡萄糖6磷酸異構Elisa
疣青霉 2--3-羧酸吡肝結合蛋白Elisa
中國平臍蠕孢 2.3-二氟-4-乙氧基苯酸Sal樣蛋白4Elisa
釀酒酵母 2,5-二(2-噻吩基)噻吩并[3,2-b]噻吩CD5分子Elisa
美澳型核果褐腐病 2-甲基-5-硝基吡啶可溶性SCD14受體Elisa
大腸埃希 達比加群酯羧酸酯1Elisa
pCMV-HA(pCMV-HA-N) 3-氯-4-吡啶甲酸乙酯載脂蛋白L1Elisa
格氏乳球 2-硝基間苯二甲酸AβpE3Elisa
脫皮毛球馬勃* 3-氨基-4-噠羧酸硬脂酰去飽和1Elisa
金灰青霉 2-氯-5-溴-3-三氟甲基吡啶硬脂酰去飽和1Elisa
香菇 3-氟-4-氧代-1-甲酸叔丁酯Δ6去飽和Elisa
黑曲霉 5-氨基-3-氟苯核因子-κB亞基p65親和肽Elisa