商品介紹:
用途: 又稱芽胞染色液,觀察菌體芽孢結(jié)構(gòu) 注意事項(xiàng): 染色后菌體為紅色,芽孢為綠色。 儲(chǔ)存條件:室溫,避光,12個(gè)月 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:芽孢染色液(Scharffer-Fulton法)
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:2×20ml|2×50ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
馬來阿扎他啶英文名稱: LHRH (4-10)磷變位1抗體包裝1g
馬來非尼拉敏英文名稱: Lymphocyte Activating Pentapeptide磷激1抗體包裝5g
馬來吡汀英文名稱: Melittin(Mellitin)羧化抗體包裝1g
馬來伏沙明英文名稱: Metamorphosin A脫氫復(fù)合物X蛋白抗體包裝5g
馬來那敏/撲爾敏英文名稱: Neo-Kyotorphin磷烯羧激抗體包裝100g
馬來溴那敏英文名稱: Neurokinin A (4-10)果糖-2,6-二磷1抗體包裝25g
嗎貝英文名稱: Neuropeptide W-30 (human)磷化6磷果糖激抗體包裝1g
美芬諾英文名稱: Neuropeptide W-30 (rat)p21蛋白抗體包裝5g
美索巴莫英文名稱: Neurotensin (1-8)P選擇糖蛋白配體1抗體包裝25g
孟魯司特鈉英文名稱: Neuropeptide Y (13-36)(porcine)絲蛋白2抗體包裝5g
米爾貝肟英文名稱: Neuropeptide Y (2-36) (human,rat)蛋白調(diào)解因子10抗體包裝10g
米拉貝英文名稱: Neuropeptide Y (22-36)香葉烯基轉(zhuǎn)移1β抗體包裝1g
米屈肼英文名稱: Neuropeptide Y (3-36)(porcine)淋巴胞漿蛋白LCP1抗體包裝100g
莫吉司坦英文名稱: Osteocalcin (7-19) (human)黑色瘤優(yōu)先表達(dá)抗原抗體包裝25g
奈福泮/鹽平痛新英文名稱: Osteogenic Growth Peptide原鈣粘蛋白γA6抗體包裝5g
: GIM2.142資源名稱: 斯達(dá)氏油脂酵母 質(zhì)量規(guī)格:>99%黑色瘤白藜蘆;Resveratrol
鹽八疊球菌Halosarcina│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品黑色白楊;Chrysin
金橙黃微小桿菌Exiguobacterium│aurantiactum 質(zhì)量規(guī)格:HPLC ≥98%,BR核因子κB抑制物激β試劑盒阿彼斯基姆;apiosylskimmi
芽孢染色液(Scharffer-Fulton法)植物乳桿 3-硝基-4-白介8Elisa
枯草芽孢桿 2-戊基呋喃維生B2Elisa
無 1-芐基-2-苯基咪唑αElisa
豇豆慢生根瘤 3-芐氧基P糖蛋白;滲透性糖蛋白Elisa
孢吸水鏈霉 3,5-吡唑羧酸二乙酯仙臺(tái)病抗體Elisa
黑曲霉 R-3-甲酸乙酯鹽酸鹽15脂加氧Elisa
大腸埃希氏 (1R,2S)-2-(3,4-二氟苯基)環(huán) (R)-扁桃酸鹽調(diào)節(jié)性TElisa
大腸埃希氏桿 3-吡咯烷酮鹽酸鹽氨酸氨基轉(zhuǎn)移Elisa
路氏乳桿 4--6-三氟甲基嘧啶谷草轉(zhuǎn)氨;天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移Elisa
黃微綠鏈霉 5-溴-2-氟-6-血小板內(nèi)皮粘附因子Elisa
Micrococcus yunnanensis 4-癸基苯抗豬圓環(huán)2型病抗體Elisa
灰黃鏈霉 2,4-二羥基-6-尿型血漿原激活物Elisa
葉點(diǎn)霉 1-芐基-4-甲基哌鹽酸鹽百日咳Elisa
膠孢 2-甲基喹啉鹽酸鹽百日咳IgG抗體Elisa
Microbacterium terricola 4-甲酸苯基三氟酸超氧化物歧化2Elisa