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詳細介紹
商品介紹：
本試劑盒是一種基于WST-8而廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速、高靈敏度檢測的試劑盒，比普通的CCK-8試劑盒具有更好的檢測靈敏度和更寬的線性范圍。 WST-8是一種類似于MTT的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan(參考圖1)。細胞增殖越多越快，則顏色越深；細胞毒性越大，則顏色越淺。對于同樣的細胞，顏色的深淺和細胞數目呈線性關系。 WST-8是MTT的一種升級替代產品，和MTT或其它MTT類似產品如XTT、MTS等相比有明顯的優點。首先，MTT被線粒體內的一些脫氫酶還原生成的formazan不是水溶性的，需要有特定的溶解液來溶解；而WST-8和XTT、MTS產生的formazan都是水溶性的，可以省去后續的溶解步驟。其次，WST-8產生的formazan比XTT和MTS產生的formazan更易溶解。再次，WST-8比XTT和MTS更加穩定，使實驗結果更加穩定。另外，WST-8和MTT、XTT等相比線性范圍更寬，靈敏度更高。 WST-8和WST-1相比，檢測靈敏度更高，更易溶解，并且更加穩定。 本試劑盒可以用于細胞因子等誘導的細胞增殖檢測，也可以用于抗癌藥物等對細胞有毒試劑誘導的細胞毒性檢測，或一些藥物誘導的細胞生長抑制檢測。 本試劑盒檢測非常便捷。試劑盒僅一管已經配制好的含有WST-8的增強型CCK-8溶液，無須再進行任何配制等操作。無須使用同位素，所有的檢測步驟僅在同一塊96孔板內完成。不必洗滌細胞，不必收集細胞，也不必采用額外的步驟去溶解formazan。可以用于大批量樣品的檢測。酚紅和血清對本試劑盒的測定無明顯影響。 WST-8對細胞無明顯毒性。加入增強型CCK-8溶液顯色后，可以在不同時間反復用酶標儀讀板，使檢測時間更加靈活，便于找到佳測定時間。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
| Enhanced Cell Counting Kit-8 | 100次|500次|2500次|10000次 | 1～3天 |
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
循環免疫復合物(CIC)英文名稱：CIC ELISA Kit錨蛋白重復結構域蛋白20A3抗體包裝500g
血小板因子4(PF-4/CXCL4)英文名稱：PF-4/CXCL4 ELISA Kit錨蛋白重復結構域蛋白22抗體包裝1g
血小板因子3(PF-3)英文名稱：PF-3 ELISA Kit錨蛋白重復結構域蛋白50抗體包裝1g
血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)英文名稱：PDGFsR-α ELISA Kit氫離子轉運ATP合成6G抗體包裝5g
血小板衍生生長因子CC(PDGF-CC)英文名稱：PDGF-CC ELISA Kit錨蛋白重復結構域蛋白26抗體包裝5ml
血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)英文名稱：PDGF-BB ELISA Kit錨蛋白重復結構域蛋白26抗體包裝100mg
血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)英文名稱：PDGF-AB ELISA Kit型肝炎病核結合蛋白-1抗體包裝1g
血小板衍生生長因子AA(PDGF-AA)英文名稱：PDGF-AA ELISA Kit芳香基硫酯K抗體包裝100MG
血小板生長因子(PDGF)英文名稱：PDGF ELISA Kit神經元突觸前膜蛋白抗體包裝50MG
血小板生成(TPO)英文名稱：TPO ELISA Kit錨定蛋白G抗體包裝25g
血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)英文名稱：GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61 ELISA Kit肌動蛋白α/α-SMA/α Actin抗體包裝5g
血小板活化因子(PAF)英文名稱：PAF ELISA Kit整合樣金屬蛋白與凝血1型抗體包裝1g
血小板反應蛋白/凝血敏感蛋白1(TSP-1)英文名稱：TSP-1 ELISA Kit整合樣金屬蛋白與凝血1型-7抗體 (N端抗體)包裝250mg
血纖蛋白原降解產物(FDP)英文名稱：FDP ELISA Kit整合樣金屬蛋白與凝血1型-7抗體包裝5g
血纖蛋白原γ鏈(FGG)英文名稱：FGG ELISA Kit內收蛋白抗體包裝250mg
磷化芳香N-乙酰化轉移抗體白介2(IL2)XL413 hydrochloride 是一種有效的，選擇性的，ATP 競爭性的 Cdc7 抑制劑，IC50 值為 3.4 nM，同時對 CK2 和 PIM1
增強型CCK-8試劑盒枝狀枝孢 根皮素Delta-like ligand 1檢測試劑盒
中國節叢孢 鄰甲氧基肉桂Delta-like ligand4檢測試劑盒
麥氏交替單胞 N-Cbz-L-組氨酸Dickkopf 1檢測試劑盒
嗜管歐文氏 4-溴-3-甲酸甲酯DLEC1檢測試劑盒
豬丹絲 2-甲氧基-5-氟尿嘧啶DNA甲基轉移酶1檢測試劑盒
棒曲霉 4-氟-2-DNA修復基因XRCC1檢測試劑盒
變平滑假絲酵母 二芐基二硫代氨酸鋅D二聚體檢測試劑盒
黑木耳8808 2,6-二硫酸鹽D-乳酸檢測試劑盒
空腸彎曲桿 4-乙酰氨-2,2,6,6-四甲基-1-氧D-乳酸鹽檢測試劑盒
釀酒酵母 4-氨基-2,2,6,6-四甲基氧自由基D-天冬氨酸檢測試劑盒
高粱生平臍蠕孢 5-溴戊酸乙酯D-天冬氨酸氧化酶檢測試劑盒
糞腸球 5-溴-2-氟EB病衣殼抗原IgA檢測試劑盒
彩色豆馬勃 反式-1,2-環己二Endoglin檢測試劑盒
黑曲霉 叔戊鈉ENOSF1基因檢測試劑盒
大腸埃希氏 3,5-二氨基-6-氯吡-2-羧酸甲酯膜外核苷酸焦磷酸酶；磷酸二酯酶家族成員2檢測試劑盒
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