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詳細介紹
產(chǎn)品屬性：
中文名稱：MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：250T|500T
發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹：
MTT法細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒被廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的檢測。活細胞的線粒體中存在與NADP相關的脫氫酶，可將黃色的MTT還原生成結(jié)晶狀的藍紫色的Formazan，死細胞無此酶，MTT不被還原。在特定溶劑存在的情況下，F(xiàn)ormazan可以被*溶解。然后通過酶標儀可以測定460-630nm波長附近的吸光度。細胞增殖越多越快，則吸光度越高；細胞毒性越大，則吸光度越低。 本試劑盒靈敏度高，線性范圍寬，使用方便。 儲存條件：-20℃避光保存。 有效期：一年。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調(diào)控；
⑤細胞分化及其調(diào)控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
D-半乳糖(標準品)英文名稱： TeniposideB和T淋巴衰減蛋白抗體包裝5g
D-(標準品)英文名稱： TeniposideCD4抗體包裝150
D-甘露糖(標準品)英文名稱： Tenofovir disoproxil fumarateCD44抗體包裝2050
D-核糖(標準品)英文名稱： Tenofovir/Tenofovir disoproxil fumarate白共同抗原抗體包裝580
D-環(huán)絲(標準品)英文名稱： TenoxicamCD5抗體包裝5g
D-焦谷（標準品）英文名稱： Terbinafine 間粘附分子-1抗體包裝25g
D-木糖(標準品)英文名稱： Terbinafine 神經(jīng)粘附分子1抗體包裝5g
D-絲(標準品)英文名稱： Terbinafine HClL選擇抗體包裝25g
Deoxycorticosterone acetate...英文名稱： Terbinafine HClCD68抗體包裝5g
Dexamethasone Acetate（標準品）英文名稱： Teriparatide acetate/Human PTH(1-34)6號染色體開放閱讀框226抗體包裝100g
Dexamethasone Sodium Phosph...英文名稱： Terlipressin Acetate間隙連接蛋白30抗體包裝25g
Dexamethasone（標準品）英文名稱： Thiamphenicol2號染色體開放閱讀框69抗體包裝25g
Diethylstilbestrol（標準品）英文名稱： Thiamphenicol3號染色體開放閱讀框18抗體包裝5g
DL-精（標準品）英文名稱： Thymopentin Acetate巨噬炎癥因子1β /MIP-1β抗體包裝1g
Donepezil HCl type III(標準品)英文名稱： Tiagabine HCl外基質(zhì)金屬蛋白誘導因子抗體包裝5g
結(jié)核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR,可用于培養(yǎng)血吸蟲試劑盒熊果乙酯;Acetylursolic
威尼斯不動桿菌Acinetobacter│venetianus 質(zhì)量規(guī)格：≥675 U/mg,USP28血栓B2試劑盒細辛;2,4,5-Trimethoxy
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：含量測定血栓A2合成試劑盒香葉;Geraniol
MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒鏈格孢 2-巰基-6-甲氧基苯并噻唑脯氨酸羥化3Elisa
橙色桿孢囊 環(huán)己基乙烯基CD9分子Elisa
大腸桿 丁吡尿香草扁桃酸Elisa
長枝木霉 烯基-1,3-磺酸內(nèi)酯Wnt-5a蛋白Elisa
馬來西亞鏈霉 氮雜環(huán)丁烷-3-氨酸叔丁酯鹽酸鹽蛋白質(zhì)賴氨酸甲基轉(zhuǎn)移Elisa
平菇 1-甲基胍鹽酸鹽蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移1Elisa
產(chǎn)氣莢膜梭 C型 3-氟-5-酚二甲基精氨酸二水解1Elisa
微桿 (S)-3-叔丁氧羰基氨基二甲基精氨酸二水解2Elisa
納西桿 6-(三氟甲基)吡啶-3-二甲基精氨酸二水解1Elisa
赤褐鵝膏 6-苯基-3-噠酮二甲基精氨酸二水解2Elisa
大腸埃希氏桿 2-氨基-5-叔丁基噻吩-3-甲酸甲酯中性粒趨化因子Elisa
玫瑰色考克氏 2-氨基嘧啶-4-羧酸甲狀旁腺Elisa
平菇(黑平1號) 4-(4-甲基-1-哌)芐α7煙堿型乙酰受體Elisa
褐囊蜜環(huán) 3-硝基-2-羧基甲酯腐Elisa
乙酰微小桿 環(huán)甲酰酮解脲脲原體Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
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