詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
APD668 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
APD668是GPR119激動劑,對人GPR119和大鼠GPR119的EC50分別為2.7nM和33nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:832714-46-2 純度:99.07% 分子式:C??H??FN?O?S 分子量:477.51 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
鞘單胞菌屬干擾epsilon 1蛋白抗體Human RMND5B ELISA KitStilbene(二乙烯)免疫試劑盒
葡萄座腔菌磷化KB抑制蛋白激γ抗體Human RNASE11 ELISA KitStanozolol(康力龍)免疫試劑盒
蘇云金芽胞桿菌庫爾斯塔克亞種磷化白介1受體1抗體Human RNASEH1 ELISA KitRat Ficolin-2(FCN2)免疫試劑盒
Marivirga tractuosa白介3抗體Human PDIA4(Protein disulfide-isomerase A4) ELISA KitRactopamine(萊克多巴)免疫試劑盒
蠟狀芽孢桿菌異戊烯焦磷1抗體Human RNASE13 ELISA KitQuinolones(喹諾類)免疫試劑盒
食樹脂新鞘菌磷化胰島受體底物-1抗體Human RNASEH2A ELISA KitPig Ficolin-2(FCN2)免疫試劑盒
光孢黃叢枝珊瑚菌磷化胰島受體底物-1抗體Human RIPK1(Receptor interacting serine/threonine kinase 1) ELISA KitPhenylbutazone(保泰松)免疫試劑盒
約利曼漆斑菌胰島誘導基因1抗體Human RIC8A ELISA KitMouse Ficolin-2(FCN2)免疫試劑盒
金黃色葡萄球菌金黃亞種FC段γ受體3/免疫球蛋白G Fc段受體III抗體Human RIC8B ELISA KitHuman Heat shock protein beta-6(HSPB6)免疫試劑盒
Pseudarthrobacter磷化白介-1受體相關激4抗體Human RIMKLB ELISA KitHuman cleaved microtubule-associated protein tau(C-MAPT/C-TAU)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌IQCF1蛋白抗體Human RIMS3 ELISA KitCorticosteroid(地塞米松)免疫試劑盒
副球菌屬IQCJ蛋白抗體Human RHPN1 ELISA KitClenbuterol(克倫特羅)免疫試劑盒
大腸埃希氏桿菌抑制結合蛋白抗體Human RHPN2 ELISA KitChloramphenicol(氯霉)免疫試劑盒
慢生根瘤菌免疫球蛋白超家族成員3抗體Human APOA1BP(Apolipoprotein A-I-binding protein) ELISA KitBovine Ficolin-2(FCN2)免疫試劑盒
杏鮑菇(13 )免疫球蛋白超家族成員6抗體Human RIBC2 ELISA KitBoldenone(寶丹)免疫試劑盒
大豆慢生根瘤菌免疫球蛋白超家族成員9抗體Human RIMS3 ELISA KitBeta Lactams(β-內酰)免疫試劑盒
結核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質量規格:>98.0%(T)白術內酯III
挪威假絲酵母Candida│norvegensis 質量規格:>75.0%(GC)白術內酯Ⅱ
嗜熱鏈球菌Streptococcus│thermephilus 質量規格:>92.0%(GC)白術內酯Ⅰ
GPR119激動劑(APD668)CCL1/TCA3/I-309 嗜粒趨化蛋白CCL1抗體聚(烯共聚馬來) Mw ~216,000 to ~80,000, powder
CCL3/MIP-1 Alpha 巨噬炎性蛋白1α抗體四苯 99%
CCL4/MIP-1 Beta 巨噬炎性蛋白1β抗體軟脂 >99%(GC)
CCL5/RANTES T特異性趨化因子抗體苯三化錫 分析標準品
CCL6/C10 嗜粒趨化蛋白CCL6抗體苯三化錫 98%
CCL11/Eotaxin 1 嗜粒趨化蛋白抗體二二烯化銨/烯酰共聚物 10 wt. % in H2O
CCL12/MCP5 單核趨化蛋白5抗體對位紅 用于食品分析
CCL13/MCP-4 單核趨化蛋白4抗體巖芹 >99%(GC)