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Hoechst 33258染色液

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更新時間:2022-04-21 12:38:38瀏覽次數(shù):216

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1mL
貨號 GOY-01X9671 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研 英文名稱 Hoechst 33258染色液
Hoechst 33258染色液公司正在出售的產(chǎn)品:phospho-GAB2(Ser623) 化接頭蛋白Gab2抗體硒粉 99.9% metals basis,200目
phospho-GAB2 (Tyr452) 化接頭蛋白Gab 2抗體硒粉 ≥99.99% metals basis,200目
phospho-GAB2 (Tyr643) 化接頭蛋白Gab2抗體硒粉 ≥99.999% meta

詳細介紹

以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹:

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

發(fā)貨周期

Hoechst 33258染色液


1mL

1~3天


商品介紹:

Hoechst 33258,也稱bisBenzimide H 33258或HOE 33258,是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料,對細胞的毒性較低。Hoechst 33258染色常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。Hoechst 33258也常用于普通的細胞核染色,或常規(guī)的DNA染色。Hoechst 33258的大激發(fā)波長為346nm,大發(fā)射波長為460nm;Hoechst 33258和雙鏈DNA結(jié)合后,大激發(fā)波長為352nm,大發(fā)射波長為461nm。本Hoechst 33258染色液可直接用于固定細胞或組織的細胞核染色,也可直接用于活細胞或組織的細胞核染色。

使用說明:

使用前用生理鹽水或PBS將Hoechst 33258染色液稀釋100倍,即為工作液。

1. 對于固定的細胞或組織:

a. 對于細胞或組織樣品,固定后,適當(dāng)洗滌去除固定劑。隨后如果需要進行免疫熒光染色,則先進行免疫熒光染色,染色完畢后再按后續(xù)步驟進行Hoechst 33258染色。如果不需要進行其它染色,則直接進行后續(xù)的Hoechst 33258染色。

b. 對于貼壁細胞或組織切片,加入少量Hoechst 33258工作液,覆蓋住樣品即可;對于懸浮細胞,至少加入待染色樣品3倍體積的工作液,混勻。室溫放置3-5分鐘。

c. 吸除Hoechst 33258染色液,用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次,每次3-5分鐘。

d. 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細胞發(fā)生凋亡時,會看到凋亡細胞的細胞核呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染。

2. 對于活細胞或組織:

a. 加入適當(dāng)量Hoechst 33258工作液,必須充分覆蓋住待染色的樣品,通常對于六孔板一個孔需加入1mL工作液,對于96孔板一個孔需加入100μL工作液。

b. 在適宜于細胞培養(yǎng)的溫度下培養(yǎng)20-30分鐘。棄染色液,用PBS或培養(yǎng)液洗滌2-3次即可進行熒光檢測。

儲存條件:-20℃避光,有效期一年。

公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟:

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。

2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測:

染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測:

染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
Toll樣受體4(TLR4)英文名稱:TLR4 ELISA Kit表面趨化因子受體1抗體包裝1g

Toll樣受體3(TLR3)英文名稱:TLR3 ELISA Kit表面趨化因子受體2抗體包裝100g

Toll樣受體2(TLR2)英文名稱:TLR2 ELISA Kit表面趨化因子受體3抗體包裝25g

Thy1細胞表面抗原(Thy1)英文名稱:Thy1 ELISA Kit表面趨化因子受體4抗體包裝500g

TGFβ誘導(dǎo)早期應(yīng)答基因1(TIEG1)英文名稱:TIEG1 ELISA Kit活化半胱蛋白蛋白-3抗體包裝25ml

TATA框結(jié)合蛋白關(guān)聯(lián)因子12(TAF12)英文名稱:TAF12 ELISA Kit抗Ⅵ型膠原抗體包裝5ml

SRC/FGR/YES相關(guān)FYN癌基因(FYN)英文名稱:FYN ELISA Kit半胱蛋白8抗體包裝25g

Smad同源物7(Smad7)英文名稱:Smad7 ELISA Kit信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基8抗體包裝5g

Smad同源物3(Smad3)英文名稱:Smad3 ELISA Kit表面趨化因子受體10抗體包裝1g

Smad同源物2(Smad2)英文名稱:Smad2 ELISA Kit轉(zhuǎn)鐵蛋白受體抗體包裝5g

Smad同源物1(Smad1)英文名稱:Smad1 ELISA Kit鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體2抗體包裝1g

Slit同源物3(Slit3)英文名稱:Slit3 ELISA Kit周期檢測點激1抗體包裝25g

Slit同源物2(Slit2)英文名稱:Slit2 ELISA Kit鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1抗體包裝5g

Slit同源物1(Slit1)英文名稱:Slit1 ELISA Kit尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子2/3抗體包裝1g

Sideroflexin1蛋白(SFXN1)英文名稱:SFXN1 ELISA Kit周期H抗體包裝5g

白色鏈霉菌Streptomyces│albus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A1試劑盒亞麻;Gamma linolenic

香菇Lentinula│edodes 質(zhì)量規(guī)格:>98%,國產(chǎn)美侖異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A0試劑盒野漆樹苷;Rhoifolin

ATCC43308資源名稱: 鰻弧菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,異質(zhì)核糖核蛋白Q試劑盒葉黃制菌;Xanthatin
Hoechst 33258染色液藤黃微球 鹽酸阿洛司瓊琥珀酸脫氫Elisa

土生哈薩克斯坦酵母 1-BOC-吡咯烷-3-甲酰類嗜TⅠ型病Elisa

短波單胞 1-Boc-3-吡咯烷甲酸甲酯類T白血病病抗體Elisa

凍土毛霉 2,6-二溴-4,8-雙[(2-乙基己基)氧基]-苯并[1,2-B:4,5-B']二噻吩α1受體自身抗體Elisa

柑橘莖點 4-甲氧基-7-氮雜半胱氨酸Elisa

變幻青霉 2-哌甲酸甲酯相關(guān)蛋白A抗體Elisa

紅根須腹 4-氯-3-甲氧基-2-甲基吡啶 N-氧化物幽門螺旋桿抗體Elisa

康寧木霉 2-乙酰氧基-2,4-二氟苯乙酮葡萄糖Elisa

總狀毛霉 N,N’-二-(2-辛基十二烷基)-2,3,6,7-四溴-1,4,5,8-萘四羧酸二酰乳酸Elisa

蟲草屬 3-叔丁氧羰基氨基-1-甲酸叔丁酯蛋白激C結(jié)合蛋白1Elisa

四川散斑殼 9,10-二基蒽內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白抑制劑Elisa

馬賽 對氯甲酸叔丁酯血管緊張轉(zhuǎn)化Elisa

白地霉 4-辛氧基苯酸端粒Elisa

糙皮側(cè)耳 5-溴-3-(三氟甲基)-2-基吡啶膳食纖維Elisa

釀酒酵母 1-BOC-哌-2-甲酸膜聯(lián)蛋白-VElisa

 


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