以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
商品介紹:
英文名稱:10058-F4 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg 10058-F4是一種c-Myc的抑制劑,能夠抑制c-Myc-Max的相互作用,阻止c-Myc目的基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄激活。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):403811-55-2 純度:98.03% 分子量:249.35 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
阿舒假囊酵母染色體區(qū)域穩(wěn)定蛋白/核輸出蛋白1抗體Human HBXIP(Hepatitis B virus X-interacting protein) ELISA Kit人A組鏈球菌多糖抗原(ASP Ag)免疫試劑盒
釀酒酵母磷化轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體Human MST1R(Macrophage-stimulating protein receptor) ELISA Kit人A激PRKA錨定蛋白12(Akap12)免疫試劑盒
豬鏈球菌ETS相關(guān)蛋白71抗體Human LOR (Loricrin) ELISA KIT人AT豐富結(jié)合域1A(ARID1A)免疫試劑盒
枯草芽胞桿菌外胚層發(fā)育不良蛋白1抗體Human LRTM1 (Leucine-rich repeat and transmembrane domain-containing protein 1) ELISA KIT人Apelin 免疫試劑盒
節(jié)狀鐮孢ETV3L蛋白抗體Human LDLRAP1 (Low density lipoprotein receptor adapter protein 1) ELISA KIT人Apelin 36(AP36)免疫試劑盒
直絲淡紫灰鏈霉菌酪蛋白激受體B6抗體Human LRRN4CL (LRRN4 C-terminal-like protein) ELISA KIT人apelin 13(AP13)免疫試劑盒
慢生根瘤菌溶血磷脂受體蛋白1抗體Human LECT1 (Leukocyte cell-derived chemotaxin 1) ELISA KIT人apelin 12(AP12)免疫試劑盒
樟疫霉溶血磷脂受體蛋白2抗體Human LZTR1 (Leucine-zipper-like transcriptional regulator 1) ELISA KIT人AP-5復(fù)合物β亞基(PP1030)免疫試劑盒
產(chǎn)氣莢膜梭菌 D型溶血磷脂受體蛋白3抗體Human LCP2 (Lymphocyte cytosolic protein 2) ELISA KIT人alpha突觸核蛋白(淀粉樣前體非A4成分蛋白)低聚物(SNCA oligomer)免疫試劑盒
產(chǎn)氣弧菌內(nèi)皮的分化蛋白6抗體Human LYL1 (Protein lyl-1) ELISA KIT人Alpha-D 酚/維生E(Alpha-D TPL)免疫試劑盒
醋化醋桿菌外生性骨疣樣蛋白2抗體Human POMC(Pro-opiomelanocortin) ELISA Kit人alpha-1腎上腺能受體(ADRA1)IgG抗體免疫試劑盒
釀酒酵母磷化eIF4E結(jié)合蛋白抗體Human SEMG2(Semenogelin-2) ELISA Kit人AFG3樣蛋白2(AFG3L2)免疫試劑盒
魯氏接合酵母磷化eIF4E結(jié)合蛋白抗體Human LMCD1 (LIM and cysteine-rich domains protein 1) ELISA KIT人Adropin(ENHO)免疫試劑盒
冷溫木拉克酵母內(nèi)皮特異性分子1抗體Human LYRM1 (LYR motif-containing protein 1) ELISA KIT人ADP-核糖基化因子5(ARF5)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌真核翻譯起始因子3F抗體Human LMO1 (Rhombotin-1) ELISA KIT人ADP-核糖基化因子4(ARF4)免疫試劑盒
蠟狀芽孢桿菌真核翻譯起始因子3H抗體Human KDM1A(Lysine-specific histone demethylase 1A) ELISA Kit人ADAM金屬肽含血小板反應(yīng)蛋白1基元4(ADAMTS4)免疫試劑盒
匍枝根霉(黑根霉)Rhizopus│stolonifer 質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,≥99.5%(GC)飛薊寧
木霉屬Trichoderma│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%飛薊汀
: 43642資源名稱: 產(chǎn)鼻疽分支桿菌 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%莪術(shù)烯
c-Myc抑制劑(10058-F4)八孢裂殖酵母 2-溴二苯并噻吩心肌轉(zhuǎn)錄因子Elisa
葡枝根霉 3-氨基聯(lián)苯雄Elisa
針葉樹散斑殼 2-(二叔丁基膦)聯(lián)苯乙酰CoA羧化Elisa
肉桂褐鏈霉 2-(二-叔丁基膦)-2'-(N,N-二甲基氨基)聯(lián)苯抑制BElisa
黃傘 2,2'-脫水-5-甲基尿苷孕酮Elisa
盤長孢狀盤孢 3--4-酮甾體合成急性調(diào)節(jié)蛋白Elisa
接近棒桿 4-溴-5-氟-2-硝苯脂肪酸合成Elisa
酵母 Α-D-五酰吡喃葡萄糖總蛋白Elisa
假單孢 3,3,3-三氟-1-細(xì)小病抗體Elisa
雪腐鐮刀 纖維五糖胰島Elisa
黃曲霉 磷化銦新城疫中強(qiáng)核酸Elisa
鏈霉屬 乙酸4-(二乙氨基)-2-丁炔酯瘟抗原Elisa
米曲霉平展變種 3,5-二叔丁基溴苯細(xì)小病抗體Elisa
卵孢柱枝孢 3-氨基-5-吡啶肌肽Elisa
糞腸球 三基膦白介1βElisa