商品介紹:
用途: 膠原纖維染色,簡(jiǎn)稱V.G染色液 注意事項(xiàng): 臨用時(shí)飽和PA溶液:酸性復(fù)紅=9:1混合后使用。 儲(chǔ)存條件:室溫,避光,12個(gè)月 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
VG染色液 |
| 100ml | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
蟲草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: ZSTK474;ZSTK-474整合α3抗體包裝5g
臭靈丹(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Luteolin 7-O-glucuronide整合β5抗體包裝1g
臭梧桐葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ganetespib整合α1抗體包裝250mg
川貝母(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lucidenic acid D白介2受體β鏈抗體 IL-2Rβ包裝5g
川陳皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DAPT (GSI-IX)干擾α2b抗體包裝25ml
川燈心草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lucidenic acid E誘導(dǎo)協(xié)同激分子配體CD275抗體包裝5ml
川楝(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Licofelone雞傳染性法氏囊病病抗體包裝100g
川楝子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ganoderenic acid C白介-17抗體包裝25g
川麥冬苷A英文名稱: Biocytin5'肌苷磷脫氫2抗體包裝100g
川木通(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: PUH71即刻早期應(yīng)答基因5樣蛋白抗體包裝25g
川木香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Orotic acid整合αV抗體包裝500g
川牛膝(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Niflumic acid白介-19抗體包裝25g
川射干(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: XYLAN白介3抗體包裝5g
川烏(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Atrazine白介3受體a鏈抗體包裝250mg
川西獐牙菜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bufexamac白介-5受體α鏈抗體IL-5Rα包裝1g
: E-3資源名稱: O1群霍亂弧菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98.5%,標(biāo)準(zhǔn)品可溶性補(bǔ)體激活產(chǎn)物SC5b9 黃豆黃;Glycitein
紫色鏈霉菌Streptomyces│violaceus 質(zhì)量規(guī)格:>99%可溶性白介7受體試劑盒黃芪皂苷II;astragaloside
蕓薹鏈格孢Alternaria│brassicae (Berk.) Sacc. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品可溶性P選擇試劑盒黃芪皂苷III;Astragalosid
VG染色液蠟狀芽孢桿 1-(3,4-二)哌酮戊二酸脫氫Elisa
弗氏志賀氏 2-羥基-4,5-二甲氧基原葉綠酸酯氧化還原Elisa
美澳型核果褐腐病 2,2-二甲基環(huán)原葉綠酸酯氧化還原AElisa
藤黃微球 N-(4-氨基-3-甲氧基苯基)甲磺酰二氫類黃酮還原Elisa
單核增生李斯特CMCC(B)54002 Palbociclib過氧化還原5Elisa
綠穗霉 5-吡啶-3-基-1,3,4-惡二唑-2-組蛋白Elisa
尼氏芽孢桿 1H-咪唑-4-甲ACC合成Elisa
漢遜德巴利酵母fabryi變種 3-氯-4-羥基甲酯ACC氧化Elisa
香菇(泌陽(yáng)3號(hào)) 2,4,6-氧基β-葡萄糖苷酸Elisa
球孢白僵 5-氯-1-甲基 吡唑-4-羧酸乙酯丁酸Elisa
平臍蠕孢 4-溴-2,3-二氯苯乳糖Elisa
空泡單胞 4-氯-3-羥基苯甲順式還原酮加雙氧1Elisa
產(chǎn)氣腸桿(現(xiàn)1) 2-氯-4-羥基苯甲羥基酮酸還原Elisa
布魯氏 2,4-二氯-5-甲基吡啶蛋白質(zhì)Elisa
不規(guī)則鹽海 2-氯-5-羥基維生BElisa