商品介紹:
用途: 又稱MGT染色液。肌肉活檢,肌纖維呈青綠色,膠原纖維呈亮綠色,細(xì)胞核呈紫色,線粒體呈紅色。 注意事項(xiàng): 新鮮材料盡快進(jìn)行冰凍切片。Gomori染色液應(yīng)冰箱內(nèi)存放,超過有效期建議丟棄以保證染色鮮亮。分化時(shí)間應(yīng)根據(jù)染液配制時(shí)間適當(dāng)調(diào)整,時(shí)間越長,分化時(shí)間約短。 儲(chǔ)存條件:4℃,避光,6個(gè)月 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:改良Gomori三色染色液
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:4×50ml|4×100ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
藏菖蒲(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: SB203580FBXL11蛋白抗體包裝10MG
藏紅花英文名稱: 3-MA;6-Amino-3-methylpurine免疫球蛋白超家族成員21抗體包裝100mg
藏木香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2,6-Dihydroxypurine;Xanthine白介9抗體包裝1g
草果(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Necrostatin-1乙酰乳合成蛋白抗體包裝100g
草烏(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Soy protein isolate異檸檬脫氫1抗體包裝25g
草玉梅(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Thyroxine Sodium Salt PentahydrateIKK激相互作用蛋白抗體包裝5g
草質(zhì)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: LY2940680磷化核因子NFκB抑制蛋白激i抗體包裝1g
草質(zhì)苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: LY-2886721白介8抗體包裝5g
側(cè)柏葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Linifanib (ABT-869)Iroquois同源蛋白5抗體包裝5g
梣(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cefapirin sodium整合αE抗體Integrin αE包裝5g
茶黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cefapirin sodium間粘附分子-2抗體包裝25g
茶黃-3'-沒食子酯英文名稱: Chlorquinaldol整合β3抗體包裝10g
茶黃-3-沒食子酯英文名稱: Decoquinate整合α4抗體包裝5g
茶堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: (S)-2-Amino-5-methoxytetralin Hydrochloride白介15抗體包裝5mg
柴胡(北柴胡)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Batimastat(BB-94)磷化白介-1受體相關(guān)激1抗體包裝1g
美澳型核果褐腐病菌Monilinia│fructicola (G. Winter) Honey 質(zhì)量規(guī)格:含量測定克拉拉蛋白試劑盒環(huán)黃芪;Cycloastragenol
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體試劑盒葫蘆D;Cucurbitacin D
小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR可溶性腫瘤壞死因子受體2試劑盒葫蘆 E ;cucurbitacin
改良Gomori三色染色液嗜腳動(dòng)物咸海鮮球 2,4-二溴三亞精合Elisa
硝酸鹽還原嗜鹽堿桿 4-氨基-2-氟三氟甲苯亞精合Elisa
棲土曲霉 3-氯-5-(三氟甲基)苯L-蘋果酸脫氫Elisa
矩圓黑盤孢 2-氟-4-(三氟甲基)苯D-蘋果酸脫氫Elisa
孤島海桿狀 3-(2-氯-6-氟苯基)-5-甲基異唑-4-羰基氯甜菜Elisa
嗜松籃狀 4-氨基丁酸乙酯 鹽酸鹽海藻糖Elisa
環(huán)狀芽胞桿 硝酸鎵(III) 水合物溶谷蛋白Elisa
植物乳桿植物亞種 Boc-O-芐基-D-蘇氨酸溶蛋白Elisa
黑曲霉 3-氯-5-(三氟甲基)苯甲紅色熒光蛋白Elisa
*櫻桃鏈格孢 2,6-二溴甲苯尿Elisa
球孢白僵 4-(基乙酰)甲酯色氨酸轉(zhuǎn)氨Elisa
亞歷山大富鹽 (R)-Baclofen色氨酸轉(zhuǎn)氨Elisa
爪哇根霉 3-甲氨基嗜環(huán)蛋白親環(huán)AElisa
黑曲霉 2-溴-3-己基噻吩焦磷酸Elisa
栗疫 醋酸銻赤霉12Elisa