商品介紹:
PF-915275是一種有效的選擇性人11β-羥基類固醇脫氫酶1型(11βHSD1)抑制劑(Ki<1nM),具有良好的臨床前藥物代謝動力學(xué)性質(zhì)。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:857290-04-1 分子式:C??H??N?O?S 分子量:350.39 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:11βHSD1抑制劑(PF-915275)
英文名稱:PF-915275
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
貝氏葡萄座腔菌人類狀瘤病18 E7抗體Human SBDS ELISA Kit貂ELISA Kit
類產(chǎn)堿假單胞菌人類狀瘤病31 E7抗體Human SA1 ELISA Kit貂環(huán)磷腺苷(cAMP)免疫試劑盒
釀酒酵母轉(zhuǎn)錄因子HES2抗體Human SCAP ELISA Kit貂環(huán)磷鳥苷(cGMP)免疫試劑盒
居海綿溶桿菌轉(zhuǎn)錄因子HES3抗體Human SAPS3 ELISA Kit大象ELISA Kit
毛柄金錢菌(金針菇)多磷肌激IPMK抗體Human SRGN(Serglycin) ELISA Kit大象孕激/孕(PROG)免疫試劑盒
黃色孢鏈霉菌IKK復(fù)合物相關(guān)蛋白抗體Human SARS2(Serine–tRNA ligase, mitochondrial ) ELISA Kit大象黃體激(LH)免疫試劑盒
總狀共頭霉IQSEC2抗體Human SAR1B ELISA Kit大象睪(T)免疫試劑盒
環(huán)圈鏈霉菌交叉蛋白2抗體Human SARM1 ELISA Kit大象促卵泡(FSH)免疫試劑盒
木犀青霉三磷肌苷焦磷抗體Human SASS6 ELISA Kit大象雌激(E)免疫試劑盒
葡萄球菌屬吲哚2,3-雙加氧抗體Human SART3 ELISA Kit植物ELISA Kit
丁香假單胞菌白介19抗體Human SART1 ELISA Kit植物蔗糖磷合成(SPS)免疫試劑盒
馬來西亞鏈霉菌抑制A/Inhibin α抗體Human SARS2(Serine–tRNA ligase, mitochondrial ) ELISA Kit植物玉米核苷(ZR)免疫試劑盒
鮑氏桑黃胰島基因增強(qiáng)結(jié)合蛋白1/2抗體Human SAMD4B ELISA Kit植物吲哚乙(IAA)免疫試劑盒
黃曲霉磷化白介-1受體相關(guān)激1抗體Human SAMD9 ELISA Kit植物維生K1(VK1)免疫試劑盒
大豆慢生根瘤菌磷化白介-1受體相關(guān)激1抗體Human MVP(Major vault protein) ELISA Kit植物維生E(VE)免疫試劑盒
漢遜德巴利酵母磷化白介-1受體相關(guān)激1抗體Human S100A3 ELISA Kit植物維生D3(VD3)免疫試劑盒
嗜菌Acidiphilium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%9-氧基喜樹堿
: =ATCC33841=NCTC11330資源名稱: 弗氏弧菌 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,pestizides≤1 ppm2"-O-沒食子酰基金絲桃苷
茄匍柄霉Stemphylium│solani 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品大薊苷
11βHSD1抑制劑(PF-915275)phospho-B-Raf (Ser445) 化B-Raf抗體亞油酯 >99% (GC)
phospho-B-Raf (Ser601) 化B-Raf抗體亞油酯 99%
BRCA1/BAP1 癌易感因1抗體(人)色標(biāo)Standard for GC ,≥99% (GC)
Phospho-BAP1 (Ser592) 化癌易感因1抗體(人)3-巰 99%,用于生化分析
Phospho-BRCA1 (Ser1524) 化癌易感因1抗體4-氧苯烯 98%
BRCA1/BAP1 癌易感因1抗體酯 無水級, 99.5%
BRCA2 癌易感因2抗體酯 Standard for GC,>99%(GC)
BrdU 溴脫氧尿苷抗體硫 99%