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詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
20T | 1～3天 |
商品介紹：
保存條件：-20℃冰凍保存。 保存期：一年 工作原理： 在機體內部隨時都在發生著細胞的死亡。傳統上用顯微鏡來觀察細胞的死亡，其特征為核染色質的濃縮及碎片的形成。但是這種現象出現的很晚，時間也很短暫。凋亡的特征是內源性核酸內切酶被激活，細胞自身的染色質或DNA 被切割，出現單鏈或雙鏈缺口，并產生與DNA斷點數目相同的3’-OH 末端。末端脫氧核糖核酸轉移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以將標記的dUTP(DIG-dUTP)標記至3’-OH 末端，DIG-dUTP 結合在DNA斷點部位，可以通過生物素化抗抗體(Anti-DIG-Biotin)和 SABC-AP反應后，加入顯色底物 BCIP/NBT予以顯示。凋亡的細胞核呈紫藍色，從而可以在顯微鏡下觀察到著色的凋亡細胞。 試劑盒內容： 1.標記緩沖液(Labeling Buffer)1ml 2.末端脫氧核糖核酸轉移酶(TdT,×20)20μl 3.DIG-dUTP(×20)20μl 4.封閉液(Blocking Reagent)4ml 5.生物素化抗抗體(×100)20μl 6..SABC-AP(×100)20μl 7.Proteinase K(×200)50μl 8.BCIP/NBT 顯色劑(×20)0.2ml 9.抗體稀釋液4ml |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
白細胞介24(IL24)英文名稱：IL24 ELISA Kit12號染色體開放閱讀框42抗體包裝100g
白細胞激活黏附因子(ALCAM)英文名稱：ALCAM ELISA Kit11號染色體開放閱讀框46抗體包裝25g
白細胞彈性蛋白抑制因子(LEI)英文名稱：LEI ELISA Kit11號染色體開放閱讀框67抗體包裝500g
白三烯A4解(LTA4H)英文名稱：LTA4H ELISA Kit11號染色體開放閱讀框77抗體包裝5g
白介9(IL9)英文名稱：IL9 ELISA Kit11號染色體開放閱讀框16抗體包裝25g
白介8受體β(IL8Rβ)英文名稱：IL8Rβ ELISA Kit11號染色體開放閱讀框21抗體包裝5g
白介8受體α(IL8Rα)英文名稱：IL8Rα ELISA Kit11號染色體開放閱讀框24抗體包裝1g
白介7(IL7)英文名稱：IL7 ELISA Kit11號染色體開放閱讀框53抗體包裝500mg
白介6受體(IL6R)英文名稱：IL6R ELISA Kit11號染色體開放閱讀框57抗體包裝1g
白介6(IL6)英文名稱：IL6 ELISA Kit11號染色體開放閱讀框65抗體包裝25g
白介5受體α(IL5Rα)英文名稱：IL5Rα ELISA Kit11號染色體開放閱讀框71抗體包裝5g
白介5(IL5)英文名稱：IL5 ELISA Kit11號染色體開放閱讀框74抗體包裝100g
白介4(IL4)英文名稱：IL4 ELISA Kit12號染色體開放閱讀框4抗體包裝25g
白介35(IL35)英文名稱：IL35 ELISA Kit12號染色體開放閱讀框24抗體包裝1g
白介34(IL34)英文名稱：IL34 ELISA Kit環核苷門控陽離子通道蛋白CNG-1β抗體包裝5g
白葉枯病菌Xanthomonas│oryzae pv. oryzae 質量規格：>99%試劑盒鹽去氫駱駝蓬堿;Harmine Hyd
藤黃微球菌Micrococcus│luteus 質量規格：>98%,BR音猬因子N端試劑盒異佛手柑內酯 ;Isobergapten
: 1197資源名稱: 福氏志賀氏菌 質量規格：HPLC≥98%,標準品音猬因子試劑盒右旋四氫巴馬汀 ; D-Tetrahyd
細胞凋亡檢測試劑盒Ⅱ(AP)枯草芽孢桿 N-BOC-環谷氨酰Elisa
微小桿 超氧化物歧化1Elisa
釀酒酵母 4-溴-1-甲基-1H-1,2,3-噻唑鈣離子Elisa
蟻巢傘屬 5-溴-2-氯-6-甲基吡啶巨泌乳Elisa
金灰青霉 4-N-CBZ-氨甲基AFB1-DNA加合物Elisa
露濕漆斑 雙硬脂酸甘油酯甲胎蛋白1Elisa
根瘤 單硬脂酸酯血脂Elisa
淺綠氣球 5-氯吡啶-2-羧酸甲酯恢復蛋白Elisa
小青霉 (2R,3S)-3-苯基異絲氨酸鹽酸鹽鈣Elisa
枯草芽孢桿 1(或2)-甲基萘磷Elisa
松杉靈芝 3-氯-4-(吡啶-3-基)-1,2,5-噻二唑白介33受體Elisa
尖孢鐮刀棉花專化型 2--5-NSMCE2Elisa
梨頭霉(+) 2-溴-5-溴甲基噻唑谷氨酸鹽Elisa
凸臍儒孢 2-三氟甲基-4-氯吡啶磷脂酸Elisa
古布爾班克氏屬 6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸軟脂酸Elisa
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