詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:20S蛋白酶體抑制劑(MG-132)
英文名稱:20S proteasome inhibitor
產品規格:5mg|10mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
英文名稱:20S proteasome inhibitor 產品規格:5mg|10mg|50mg|100mg MG-132是一種有效的非特異性的20S蛋白酶體(20S proteasome)抑制劑,作用于β5糜蛋白酶樣(β5chymotrypsin)活性位點,IC50為24.2nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:133407-82-6 純度:98.0% 分子量:475.62 MG-132結構式 儲存條件:-20℃避光,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
耐冷類諾卡氏菌鈣/鈣調依賴蛋白激2α抗體Human ERGIC1 ELISA Kit兔子白介3(IL-3)免疫試劑盒
紅細菌屬周期蛋白結合蛋白抗體Human EPS15R ELISA Kit兔子白介2(IL-2)免疫試劑盒
球孢白僵菌分裂周期蛋白2抗體Human ERGIC2 ELISA Kit兔子白介1可溶性受體I (IL-1sR Ⅰ)免疫試劑盒
酪丁梭菌DNA分裂周期調控蛋白45抗體Human ERBB3 ELISA Kit兔子白介1β (IL-1β)免疫試劑盒
橄欖產色鏈霉菌染色體相關蛋白H抗體Human ERBB4(Receptor tyrosine-protein kinase erbB-4) ELISA Kit兔子白介1α(IL-1α)免疫試劑盒
簡青霉中心體蛋白質76抗體Human EPB41L2 ELISA Kit兔子白介18(IL-18)免疫試劑盒
Streptococcus sanguinis中心體蛋白152抗體Human ERC1 ELISA Kit兔子白介13(IL-13)免疫試劑盒
異常威克漢姆酵母酪蛋白激1γ2/casein kinase Iγ1抗體Human EPB41L3 ELISA Kit兔子白介11(IL-11)免疫試劑盒
山東糖多孢菌唇裂和腭裂相關跨膜蛋白1抗體Human EPHA6 ELISA Kit兔子白介10(IL-10)免疫試劑盒
水稻腸桿菌趨化樣因子超家族成員8抗體Human EPHA7 ELISA Kit兔子白介1(IL-1)免疫試劑盒
擬康氏木霉趨化樣因子超家族成員1抗體Human EPHX2 ELISA Kit兔子γ干擾(IFN-γ)免疫試劑盒
梭菌神經蠟樣質脂褐質沉積病蛋白CLN6抗體Human EPHA8 ELISA Kit兔子β血小板球蛋白/β血栓環蛋白(β-TG)免疫試劑盒
腦膜膿性金黃桿菌甘結合蛋白抗體Human EFNB1(Ephrin B1) ELISA Kit兔子β連環蛋白/聯蛋白(β-Cat)免疫試劑盒
異常漢遜酵母異常變種多巴D1受體相互作用蛋白抗體Human EPN3 ELISA Kit兔子β4整合(ITG β4/CD104)免疫試劑盒
鏈格孢 蘋果專化型Capicua蛋白抗體Human EPRS ELISA Kit兔子α干擾(IFN-α)免疫試劑盒
釀酒酵母碳酐6抗體Human EPS15R ELISA Kit兔子α2抗纖溶(α2-AP)免疫試劑盒
黑曲霉Aspergillus│niger 質量規格:>98%,BRSyndecan-1/CD138試劑盒麥冬皂苷C
門多薩假單胞菌Pseudomonas│mendocina 質量規格:>98%,BRSWI/SNF相關, 基質關聯,肌動蛋白依賴染色質調控因子,亞家族c,成員1試劑盒麥冬皂苷A
糙皮側耳(平菇)Pleurotus│ostreatus 質量規格:>98%,BRSTEAP家族成員4試劑盒馬兜鈴內酰
20S蛋白酶體抑制劑(MG-132)阿維鏈霉 Boc-N-甲基-O-芐基-L-酪氨酸谷氨酸受體1Elisa
大腸埃希氏桿 3,5-二氟苯甲谷氨酸受體2Elisa
蚜蟲莫氏黑粉 3,4-二氟苯谷氨酸脫氫Elisa
樟疫霉 2,5-二基溴化鎂 (1M THF溶液)谷氨酸脫羧65Elisa
楊生盾殼霉 2,3-二氟三氟甲苯谷氨酰Elisa
Lysinibacillus xylanilyticus 3,4-二氟苯Elisa
尖孢鐮孢 氨基三亞甲基膦酸過氧化Elisa
蝙蝠蛾擬青霉 N-CBZ-羥脯氨酸甲酯硒過氧化3Elisa
泡盛曲霉 2,3-二氟骨保護Elisa
釀酒酵母 三(N,N-四亞甲基)磷酰骨保護配體Elisa
釀酒酵母 二乙基鋅骨成型蛋白2Elisa
大腸埃希氏 1-溴-2-(三氟甲氧基)苯骨成型蛋白4Elisa
混料芽孢桿 氧化鈀,一水骨成型蛋白6Elisa
麥根腐平臍蠕孢 順二酸二丁基錫骨成型蛋白7Elisa
黑木耳 對位紅骨成型蛋白受體1AElisa