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人胚胎心肌組織來源細胞實驗原理
閱讀：359 發布時間：2017-8-15| 提 供 商 | 上海谷研實業有限公司 | 資料大小 | 17.8KB |
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| 資料類型 | JPG 圖片 | 瀏覽次數 | 359次 |
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人胚胎心肌組織來源細胞實驗原理：
1收到細胞后當天換液，全部更換成客戶自己的新鮮培養基，放進培養箱，第二天再消化。
2邊觀察邊消化，CCC-HHM-2人胚胎心肌組織來源細胞根據細胞的形態，終止消化時間，采取以半分鐘間隔吹打細胞邊緣，如可吹打下來，即終止消化。客戶摸索比較好的消化時間。
3隨細胞有一份細胞操作說明書，請客戶仔細查看。
4記得加1%雙抗，降低被污染的概率。另外盡早凍存留種，以備后用。
5售后時間為一周，于細胞本身的質量問題，而因乙方自己不當操作（不規范操作，消化過度，不加雙抗導致的污染等）導致的細胞問題不在售后范疇。
6收到細胞后，如細胞狀態不佳，或培養中遇到問題，煩請當天盡快，以便處理。當天及時反饋細胞情況和細胞照片是售后跟蹤處理重要的參考依據，請您務必重視。
7剛收到細胞時，胎牛血清可以用15%培養兩三天，利于細胞盡快恢復狀態，細胞狀態穩定后，再調回10%即可。
IDMEM：適合細胞密度低，生長困難的細胞。如雜交細胞的篩選，DNA轉染后轉化細胞的篩選培養。
RPM1640：應用zui廣泛的培養基之一。懸浮細胞培養，主要針對淋巴細胞，也適合其他細胞。
199、109培養基：成分齊全，培養效果較好。
F10培養基：適合小鼠及人類二倍體細胞培養。
F12培養基：CCC-HHM-2人胚胎心肌組織來源細胞適合單細胞分離培養及無血清培養。
McCoy’s培養基：特別適合原代細胞及較難培養細胞的生長。
人胚胎心肌組織來源細胞培養條件： 詳見細胞說明書
【傳代方法】 建議1:2-1:3 兩天換液一次
【凍存條件】 詳見細胞說明書
【主要文獻】 請具體查閱相關發表文章
實驗室細胞培養經驗分享：
啟蒙老師的重要性：一般進實驗室都有師兄師姐帶著做，他們就是你做細胞的啟蒙老師。他們的操作手法、細節、理論講解就成了你操作的準則，如營養液、細胞瓶的擺放位置；滅菌處理程序；開蓋手法；細胞吹打手法等等。要學會他們的正確操作，在*次的時候就要重視。
像養孩子一樣養細胞：細胞真的很脆弱，每天都去看看它，以防止出現培養箱缺水、缺二氧化碳、停電、溫度不夠等異常現象，也好及時解決這些意外，避免重復實驗帶來的更大痛苦。
好細胞要及時保種：細胞要分批傳代，這樣即使有一批出了問題，還有一批備用的。像后者一般人可能不容易做到。但這是我血的教訓，有一次細胞污染了，全軍覆沒。當時可后悔沒有保種。
每種細胞都有自己的特性，要區別對待：細胞跟人一樣，不同的細胞，培養特性是不一樣的。培養過程中要細細體會。不同細胞株使用不同的培養基和血清。
如我養的平滑肌細胞很活躍，喜歡熱鬧，2~3天就好多人口，而且不太愛吃喝，真是養的孩子了。內皮細胞和平滑肌細胞性格相近，不過它很不講衛生，也很邋遢，里面有很多分泌屋，要經常換洗才行。RAW264.7細胞也很開朗，而且很能吃，要經常喂它，頭疼的是細胞很容易活化，培養它的瓶子和環境沒有內毒素才好。
玻璃器皿的清洗。對于玻璃器皿（細胞瓶、裝營養液的瓶子、小青霉素瓶等）要先用洗衣粉刷干凈（注意死角），然后沖干凈。用酸液浸泡 24 h 以上，CCC-HHM-2人胚胎心肌組織來源細胞之后用清水沖洗 10 遍，除去殘留酸液。瓶子之類，沖洗過程要使勁搖晃。然后在雙蒸水浸泡24h。晾干后包扎，160℃干烤2h待用。
試劑配置。細胞培養用的液體一般使用雙蒸以上的水即可。并注意pH值的調節。
無菌檢驗。主要采用過濾除菌：如胰酶、抗生素、G-418溶液、各類培養基、丙酮酸鈉、谷氨酰胺等。有些可以采用高壓滅菌：如PBS、D-Hank's等。
人胚胎心肌組織來源細胞試劑分裝保存：包括營養液、胰酶、血清等。