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技術文章

轉化細胞在實驗中被污染的原因

閱讀:394          發布時間:2018-7-24

     我司生物技術指出:污染是轉化細胞培養的大敵。預防和避免污染是細胞培養成功的關鍵之一。一開始就要十分重視,防止污染,否則會前功盡棄,不僅浪費時間,而且浪費人力、物力,甚至造成無法彌補的損失。細胞培養中常見的生物污染類型有7種,分別是細菌污染、支原體污染、原蟲污染、黑膠蟲污染、真菌污染、病毒污染以及非細胞污染。他們在細胞培養中污染的特點如下:

1、細菌:細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據感染細菌的不同,可有不同的外形,培養液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯。

2、支原體:黑色的,好象多為多形,培養液一般培養液一般會渾濁,原體感染,國內血清很多都沒有做支原體陰性檢測,而支原體是牛血清中zui常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后,細胞病變不很明顯,只是慢慢凋亡。

3、黑膠蟲:可以穿透濾膜,也可以通過空氣傳播,低倍下為黑色點狀,高倍下可看見黑色的小蟲游來游去,培養液也是不渾的,一般不會太影響,細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態良好,且觀測到的運動物無明顯增多,且培養液顏色、透明度無明顯變化,可在同一批號的血清養的細胞中發現類似現象。對細胞生長狀態不會有明顯影響,在細胞增殖旺盛之后會自然消失,除更換血清外無須特殊處理。

4、真菌:一般培養液清亮,不變色,鏡下有絲狀物,有些真菌開始很像死細胞碎片,只是它很多很多的小塊很清楚,象珊瑚狀,不象細胞碎片分不清,慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢,不象細菌那么容易被發現,但是一旦發現有它的存在細胞就被污染了,也很難救活了。

5、原蟲:培養液可輕微渾濁,顯微鏡下那些細小的點狀物數量非常多,輕微活動,細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢,而且細胞狀態不好,邊緣不清楚,轉化細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養。這種共生是非常普遍的,但他們的數量小,細胞站優勢所以不會影響到細胞的正常生長,只有當他們到達一定的數量時就會影響到細胞的生長,zui終形成惡性循環。

 phospho-MEK1 (Thr286) 凋亡抑制蛋白抗體

 Phospho-MEK1/2 (Ser217/221) 凋亡相關蛋白激酶3抗體

 Phospho-MEK1/2 (Ser221) 凋亡相關蛋白激酶2抗體

 phospho-MEK1/MAPKK1(Ser298) 凋亡相關蛋白激酶1抗體

 Phospho-MEK6 (Ser202) 凋亡相關蛋白TFAR19抗體

 Phospho-MEK6 (Ser207) 凋亡相關蛋白4抗體

 Phospho-Merlin (Ser518) 凋亡調節基因之一抗體(短型)

 Phospho-Met (Tyr1003) 凋亡調節基因之一抗體

 Phospho-Met (Tyr1234/1235) 凋亡蛋白活性因子-1抗體(N端)
轉化細胞

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