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[供應]R7092S—RNase R

貨物所在地:北京北京市

更新時間:2024-03-08 09:13:30

有效期:2024年3月8日 -- 2025年3月9日

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RNase R (Ribonuclease R)是由碧云天自主研發的PerfectProtein™技術平臺表達、純化獲得的一種來源于大腸桿菌的Mg2+依賴的3'→5'核糖核酸外切酶。RNase R能消化線性RNA (Linear RNA),但不能消化環狀RNA (Circular RNA, circRNA)、套索RNA (Lariat RNA)、3’突出末端少于7個核苷酸的雙鏈RNA以及具有復雜二

RNase R (Ribonuclease R)是由碧云天自主研發的PerfectProtein™技術平臺表達、純化獲得的一種來源于大腸桿菌的Mg2+依賴的3'→5'核糖核酸外切酶。RNase R能消化線性RNA (Linear RNA),但不能消化環狀RNA (Circular RNA, circRNA)、套索RNA (Lariat RNA)、3’突出末端少于7個核苷酸的雙鏈RNA以及具有復雜二級結構的tRNA、5S RNA等[1, 2]。

RNase R常用于消化除去線性RNA,以獲得環狀RNA (也稱環形RNA)、內含子套索(Intron lariat)等非線性RNA。RNase R為環狀RNA的研究提供了極大的便利,也可以給研究RNA剪接(RNA splicing)帶來很大的便利。套索RNA是在pre-mRNA的剪接內含子過程中產生的,經RNase R消化,可以從總RNA中被分離出來而用于后續研究。

碧云天生產的RNase R不能消化環狀RNA但可以消化線性RNA的效果請參考圖1。

圖1. 碧云天生產的R7092 RNase R可以消化線性RNA但不會消化環狀RNA的效果圖。在20µl反應體系中含20mM Tris-HCl (pH8.0), 0.1mM MgCl2和100mM KCl,以長度為22nt的等摩爾數(4pmol,約0.03μg)的線性或環狀RNA作為底物,并加入圖中ZHI定量的本產品或國外L公司(Competitor)的RNase R。37℃孵育30min,70℃孵育10min終止反應。隨后加入4μl 6X DNA Loading Buffer (D0071),95℃變性5min,然后取出15μl進行7M Urea 15%聚丙烯酰胺凝膠電泳(室溫條件下用0.5X TBE作為電泳液,180V電泳90min,NA-Red溶液(1000:1) (D0128/D0130)室溫染色10min,拍照觀察結果)。如圖所示,本產品與國外L公司的產品相比,具有類似的消化效果。圖中效果僅供參考,在不同實驗條件下獲得的效果可能會有所不同,圖中效果僅供參考。

用途:環狀RNA研究,環狀RNA中去除線性RNA,可變剪接研究,內含子套索序列的分析和鑒定等。

來源:由大腸桿菌表達,表達基因為E.coli RNase R基因。

活性定義:One unit converts 1μg of poly-r(A) into acid-soluble nucleotides in 10 minutes at 37℃ in 20mM Tris-HCl (pH8.0), 100mM KCl and 0.1mM MgCl2

純度:不含DNase,不含其它RNA內切酶和外切酶活性。

酶儲存溶液:50mM Tris-HCl (pH7.5 @25℃), 200mM NaCl, 1mM DTT, 0.1mM EDTA, 50% (v/v) Glycerol, 0.1% (w/v) Triton X-100。

10XReaction Buffer:200mM Tris-HCl (pH8.0 @25℃), 1M KCl, 1mM MgCl2.

失活或抑制:70℃加熱10分鐘可使RNase R失活。


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