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什么是熒光原位雜交技術
什么是熒光原位雜交技術
你知道什么是熒光原位雜交嗎？讓我們一起來看看吧！
一、FISH的定義
熒光原位雜交技術（FISH）是一種利用熒光信號檢測探針的原位雜交技術。它將熒光信號的高靈敏度、安全性及直觀性和原位雜交的高特異性結合起來，通過熒光標記的核酸探針與待測樣本核酸進行原位雜交。在熒光顯微鏡下對熒光信號進行辨別和計數，從而對染色體或基因異常的細胞和組織樣本進行檢測和診斷，為各種基因相關疾病的分型、預前和預后提供準確的依據。
二、FISH的原理
FISH分為直接法和間接法。
直接法是在已知堿基序列的核酸探針上標記熒光素，在組織切片、間期細胞及染色體標本上與靶核酸進行原位雜交。因所形成的雜交體帶有熒光素。故可在熒光顯微鏡下直接觀察。
間接法使用非熒光物質標記的核酸探針。如生物素或地高x等標記探針，再通過親和連接或免疫反應帶入熒光物質來檢測雜交體的存在。
廣義上講，FISH靶序列可以是DNA或RNA，既可以用來進行基因組層面的研究，也可以進行表達層面的研究。
目前常用的熒光素有異硫氰酸熒光素、得克薩斯紅、羅丹明及其衍生物四甲基異硫氰酸羅丹明等。
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