詳細(xì)介紹
反應(yīng)五要素:
豬流感病毒通用型(SIV-U) 核酸檢測試劑盒圖片參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
豬流感病毒通用型(SIV-U) 核酸檢測試劑盒圖片 | 48T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
自備物品:
豬流感病毒通用型(SIV-U) 核酸檢測試劑盒圖片15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
廣藿香提取物英文名稱:Patchouli extractCAS號:分子式:分子量:
溴鎂英文名稱:Phenyl bromideCAS號:100-58-3分子式:181.31分子量: C6H5MgBr
對二酚英文名稱:HydroquinoneCAS號:123-31-9分子式:110.11分子量: C6H6O2
二甲二茂鈦(5%四氫喃/甲溶液)分子式:208.13分子量: C12H16Ti英文名稱:Two methyl two titanocene (5% tetrahydrofuran / toluene solution)CAS號:1271-66-5
間氟分子式:222分子量: C6H4FI英文名稱:Fluorinated iodobenzeneCAS號:1121-86-4
2-甲-5-溴嘧分子式:173分子量: C5H5BrN2英文名稱:2- methyl -5-CAS號:7752-78-5
1,2,4,5-四氟分子式:150.07分子量: C6H2F4英文名稱:Four - 1,2,4,5-CAS號:327-54-8
磺胺對甲氧嘧分子式:280.31分子量: C11H12N4O3S英文名稱:SulfamethoxydiazineCAS號:651-06-9
2-氯-5-吡分子式:239.44分子量: C5H3ClIN英文名稱:2- chloride -5-CAS號:69045-79-0
4-溴鄰二甲分子式:185.06分子量: C8H9Br英文名稱:4- bromideCAS號:583-71-1
雙二異丙氯磷英文名稱:BIS two amino acidCAS號:56183-63-2分子式:266.793分子量: C12H28ClN2P
豬流感病毒通用型(SIV-U) 核酸檢測試劑盒圖片C11orf74 11號染色體開放閱讀框74抗體 0.2ml
PCID2 PCID2蛋白抗體 0.2ml
RNF23 環(huán)指蛋白23抗體 0.2ml
FLG 絲聚合蛋白/中間絲蛋白抗體 0.1ml
RAE1 mRNA結(jié)合蛋白抗體 0.1ml
NQO1 醌氧化還原酶抗體 0.1ml
phospho-IRS1(Ser612) 磷酸化胰島素受體底物-1抗體 0.1ml
Phospho-Myt1(Ser83) 磷酸化髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1抗體 0.1ml
CROT/COT 過氧化物酶體肉堿酰基轉(zhuǎn)移酶抗體 0.2ml
FECH/Ferrochelatase 鐵螯合酶抗體 0.2ml
ADCY3 腺苷酸環(huán)化酶3抗體 0.2ml
COX1/MTCO1 細(xì)胞色素c氧化酶1抗體 0.2ml