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詳細介紹
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產品屬性：
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
| 大鼠骨內膜間充質干細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X1175 |
商品介紹：
名稱 大鼠骨內膜間充質干細胞 2.組織來源：股骨、脛骨 3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介： 大鼠骨內膜間充質干細胞分離自股骨、脛骨；骨內膜是一層致密結締組織膜，覆蓋在骨的表面（關節面除外），新鮮骨內膜呈粉紅色，含有豐富的血管、神經和成骨細胞。此外，附著于骨的肌腱、韌帶于附著部位都與骨內膜編織在一起。因而骨內膜與骨質結合甚為牢固。骨內膜富含血管、神經，通過骨質的滋養孔分布于骨質和骨髓。骨內膜分內、外兩層，外層主要是粗大的膠原纖維束，部分纖維穿入骨質，使骨內膜固定于骨面；內層疏松，含成骨細胞和破骨細胞（分別具有產生新骨質和改建骨的功能）。骨髓腔和骨松質的網眼也襯著一層菲薄的結締組織膜，叫做骨膜。骨內膜的內層和骨膜有分化成骨細胞和破骨細胞的能力，以形成新骨質和破壞、改造已生成的骨質，所以對骨的發生、生長、修復等具有重要意義。骨內膜間充質干細胞是一種具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細胞，可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經等多種組織分化，因此可以作為組織工程中的種子細胞。骨內膜間充質干細胞的體外培養條件要求較高，在培養過程中，受貼壁時間、種植密度、血清含量、培養溫度和培養基pH值等條件的影響。 5.方法簡介： 實驗室分離的大鼠骨內膜間充質干細胞采用沖洗骨髓、消化骨內膜、差速貼壁法結合培養基篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： 實驗室分離的大鼠骨內膜間充質干細胞經CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息： 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-R161 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態成纖維細胞樣 傳代特性可傳5代左右；3代以內狀態最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
MTOR 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽
MTOR 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
MTOR 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
TrkA / NTRK1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶HA標簽
TGF-beta 1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽
CCL20 轉錄變體2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
HGF 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
TNFSF10 / TRAIL 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 基因全長ORF克隆 (表達載體, 密碼子優化), 無標簽
甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 基因全長ORF克隆 (表達載體, 密碼子優化), 無標簽
大鼠骨內膜間充質干細胞肉桂 分析標準品，>99.5%（GC)香葉 98%Anti-CYP2C19 色素P450 2C19抗體
肉桂酸 ≥99.0%, FG香葉 97%Anti-CYP450 色素P450單氧化抗體
肉桂酸 天然, ≥99%, FCC香葉 Standard for GC, ≥99.0% (GC)Anti-Cyr61/IGFBP10/CCN1 富半胱肝素結合蛋白61抗體
香茅 85%,FCC乙酸香葉酯 96%Anti-CYP2E1 抗色素P450ⅡE1抗體
香茅 96%乙酸香葉酯 90%，天然, FCC, Kosher Anti-Cytochrome C 色素 C抗體
肉桂 98%香葉基酮 97%Anti-Phospho-Dab1 (Tyr220) 化Disabled 1抗體
肉桂 分析標準品，>99%（GC)甲酸香葉酯 85%Anti-Phospho-Dab1 (Tyr232) 化Disabled 1抗體
正癸 Standard for GC,≥99.5% (GC)甲酸香葉酯 85%,FCC, KosherAnti-Phospho-Dab1 (Ser491) 化Disabled 1抗體
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