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詳細介紹
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產品屬性：
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
| 真皮微血管內皮細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X1009 |
商品介紹：
名稱 真皮微血管內皮細胞 2.組織來源：皮膚組織 3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介： 人真皮微血管內皮細胞分離自真皮組織；真皮，位于表皮深層，向下與皮下組織相連，真皮結締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起，埋于基質內。其內分布著各種結締組織細胞和大量的膠原纖維彈性纖維，使皮膚既有彈性，又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網狀層。真皮的結構組成是膠原蛋白、彈性纖維以及基質。微血管內皮細胞（MEC）在炎癥反應、腫瘤生長、創面愈合過程中起著非常重要的作用。在創面愈合研究領域，由于表皮細胞、真皮成纖維細胞體外培養技術的成熟，人們對這兩種細胞早已進行了大量深入的研究。與之相比，對參與創面愈合過程的另一種主要細胞——真皮微血管內皮細胞，則因其體外分離培養技術的困難而使相關的研究受限。 5.方法簡介： 實驗室分離的人真皮微血管內皮細胞采用膠原酶-中性蛋白酶混合消化法結合密度梯度離心法、最后通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： 實驗室分離的人真皮微血管內皮細胞經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%） 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-H098 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態內皮細胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
食蟹猴 CD84 基因全長ORF克隆
食蟹猴 CD82 基因全長ORF克隆
食蟹猴 CD81 基因全長ORF克隆
食蟹猴 CD79B 基因全長ORF克隆
食蟹猴 CD83 基因全長ORF克隆
食蟹猴 ITGA6 基因全長ORF克隆
食蟹猴 IL6 基因全長ORF克隆
食蟹猴 AGRP 基因全長ORF克隆
食蟹猴 ITGB2 基因全長ORF克隆
食蟹猴 ITGAV 基因全長ORF克隆
真皮微血管內皮細胞0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Beta-defensin 127
B（2.25萬單位） 英文名稱： 產品規格：2.25萬單位*5支
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Neurturin
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Orexin
0.312-20 ng/mL 人促分裂原活化蛋白激8(MAP kinase 8)ELISA試劑盒
1.56-100 U/L 人鈣結合蛋白(CALB)ELISA試劑盒
78-5000 pg/mL 人羧酸酯5A(Carboxylesterase 5A)ELISA試劑盒
6.25-400pg/mL ELISA Kit for Human Putative peptide YY-3
LB肉湯顆粒 英文名稱：LB Broth 產品規格：300ml/袋*10
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Regulator of G-protein signaling 10
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