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詳細介紹
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
產品屬性：
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
| 小鼠脈絡膜血管內皮細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X1077 |
商品介紹：
名稱 小鼠脈絡膜血管內皮細胞 2.組織來源：脈絡膜組織 3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介： 小鼠脈絡膜血管內皮細胞分離自眼球脈絡膜組織；脈絡膜在視網膜和鞏膜之間，含有豐富血管和色素細胞，對外力沖擊的耐受性較視網膜差，當眼球受到從前面來的外力的沖擊作用通過玻璃體傳到后極部時，堅硬的鞏膜在其外面又有抵抗作用，使脈絡膜在內外兩種作用夾攻下而發生破裂和出血。脈絡膜呈暗褐色，圍繞視神經乳頭部有照膜，為青綠色帶金屬光澤的三角形區。脈絡膜是眼球中膜的后2/3處的薄膜，由纖維組織、小血管和毛細血管組成，軟而薄，棕紅色，在鞏膜和視網膜之間，續連于睫狀體后方。脈絡膜的血循環營養視網膜外層，其含有的豐富色素起遮光暗房作用。主要功能是營養視網膜外層及玻璃體，并有遮光作用，使反射的物象清楚。同時對視覺系統起保護作用，對整個視覺神經有調節作用。續連于睫狀體后方，含豐富的血管和色素細胞，有營養和遮光作用。 5.方法簡介： 實驗室分離的小鼠脈絡膜血管內皮細胞采用膠原酶-中性蛋白酶混合消化法并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： 實驗室分離的小鼠脈絡膜血管內皮細胞經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%） 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-M124 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態內皮細胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
IL1R9 / IL1RAPL2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
IL18RAP / IL1R7 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
DCN / Decorin 轉錄變體A1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
tPAβ DNA 轉錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
DAN / NBL1 轉錄變體2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
S100A4 轉錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
S100B 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
CCL22 / MDC 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
CNDP2 / CPGL 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
APOA1 / ApoAI 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
小鼠脈絡膜血管內皮細胞78-5000 pg/mL 單增李斯特菌(LM)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
大豆蛋白胨 英文名稱：Peptone from Soybean Meal 產品規格：250g
62.5-4000 pg/mL ELISA Kit for Human Galectin-3
1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Hemoglobin subunit beta
0.312-20 ng/mL 人磷脂酰基醇蛋白聚糖4(Glypican-4)ELISA試劑盒
31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Superoxide dismutase [Mn], mitochondrial
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Testosterone
TTC 英文名稱：TTC 產品規格：10g
78-5000 pg/mL 人肌動蛋白抑制蛋白1(PFN1)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Rho-related GTP-binding protein RhoC
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