詳細介紹
產品屬性:
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
大鼠肝動脈內皮細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X0819 |
商品介紹:
名稱 大鼠肝動脈內皮細胞 2.組織來源:肝動脈組織 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 大鼠肝動脈內皮細胞分離自肝動脈組織;在胚胎期,肝臟有3條動脈供血,分別來源于胃左動脈、腹腔動脈和腸系膜上動脈,這3條動脈分別的不同部位。出生后,一般保留一條動脈,大部分為起源于腹腔動脈的動脈,由其分出左、右肝動脈供應左、右半肝。偶爾也可見起源于胃左動脈的動脈或起源于腸系膜上動脈的動脈。但也有2條動脈并存的情況,如起源于腹腔動脈和起源于胃左動脈(25%),起源于腹腔動脈和起源于腸系臘上動脈(10%),而起源于胃左動脈和起源于腸系膜上動脈的2條動脈同時存在的情況比較少見。此外,還有5%像胚胎期一樣,3條動脈同時存在。這種起源于腹腔動脈以外的肝動脈稱為迷走肝動脈,如果肝臟沒有起源于腹腔動脈的動脈供血時,此種異位起源的肝動脈稱替代動脈,如果在常見肝動脈類型外,還有一支這種異位起始的動脈的一部分血流,這種肝動脈稱副肝動脈。肝動脈內皮細胞是襯于肝動脈內表面的單層扁平上皮,在炎癥時高表達黏附分子,與血流中白細胞表面黏附分子相互作用,從而介導白細胞穿越血管壁,亦屬一類非專職抗原提呈細胞。它們吞噬異物、細菌、壞死和衰老的組織,還參與集體免疫活動,包括:①血管收縮及血管舒張,從而控制血壓;②凝血(血栓形成及纖維蛋白溶解);③動脈硬化;④血管生成;⑤炎癥及腫脹(浮腫);⑥內皮細胞亦控制一些物質,如白血球進出血管。 5.方法簡介: 實驗室分離的大鼠肝動脈內皮細胞采用混合酶消化法結合差速貼壁法,并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 實驗室分離的大鼠肝動脈內皮細胞經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 包被條件PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%) 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-R034 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態內皮細胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠 TSC22D1 基因全長ORF克隆
小鼠 DHRS4 基因全長ORF克隆
小鼠 PGAM1 基因全長ORF克隆
小鼠 PSMC6 基因全長ORF克隆
小鼠 PSAP 基因全長ORF克隆
小鼠 HSPA8 基因全長ORF克隆
小鼠 TUBB2A 基因全長ORF克隆
小鼠 EIF3L 基因全長ORF克隆
小鼠 MCM7 基因全長ORF克隆
小鼠 RPL35 基因全長ORF克隆
大鼠肝動脈內皮細胞0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Glia-activating factor
疊氮鈉-七葉苷瓊脂 英文名稱: 產品規格:250g
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Myosin-1
12.5-800 pg/mL 人棕櫚酰化膜蛋白6(MPP6)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL 病毒H5N1亞型(AIV-H5N1)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法)
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Apolipoprotein A-I
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Bone morphogenetic protein 1
31.2-2000 pg/mL 人脂蛋白脂(LPL)ELISA試劑盒
果蠅培養基 英文名稱:Drosophila medium 產品規格:250g
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Netrin-4