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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-19 15:37:10瀏覽次數(shù)：241
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X1015 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 大鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1015 |
商品介紹：
名稱 大鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞 2.組織來(lái)源：腦動(dòng)脈組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 大鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自腦動(dòng)脈組織；腦動(dòng)脈有成對(duì)的頸內(nèi)動(dòng)脈和椎動(dòng)脈互相銜接成動(dòng)脈循環(huán)；靜脈系多不與同名動(dòng)脈拌行，所收集的靜脈血先進(jìn)入靜脈竇再匯入頸內(nèi)靜脈；各級(jí)靜脈都沒有瓣膜，它包括腦的動(dòng)脈系統(tǒng)和腦的靜脈系統(tǒng)。腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞主要功能：①維持血管內(nèi)外的動(dòng)態(tài)平衡；②合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)；③維持凝血和纖溶的動(dòng)態(tài)平衡。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞采用膠原酶-中性蛋白酶混合消化法并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%） 培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-R100 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)內(nèi)皮細(xì)胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠 LGALS8 基因全長(zhǎng)ORF克隆
斑馬魚 BMP2A 基因全長(zhǎng)ORF克隆
斑馬魚 EFNB2A 基因全長(zhǎng)ORF克隆
斑馬魚 VEGFAA 基因全長(zhǎng)ORF克隆
斑馬魚 BMP4 基因全長(zhǎng)ORF克隆
狗 NGF 基因全長(zhǎng)ORF克隆
狗 EGFR 基因全長(zhǎng)ORF克隆
兔 ERBB3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
食蟹猴 B2M 基因全長(zhǎng)ORF克隆
食蟹猴 KLRD1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞62.5-4000 pg/mL 人畸胎瘤衍生生長(zhǎng)因子1(TDGF1)ELISA試劑盒
31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Folic acid
15.6-1000 pg/mL 人白介素34(IL-34)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 二酰基甘油（Diacylglycerol）ELISA試劑盒
Bolton肉湯添加劑 英文名稱：Bolton Broth Supplement 產(chǎn)品規(guī)格：1ml/支*5
0.156-10 ng/mL 人組織蛋白G(CTSG)ELISA試劑盒
假單胞CFC選擇性培養(yǎng)基添加劑(凍干) 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：1ml*5
93.75-6000 pg/mL 口蹄疫病毒通用型(FMDV-U)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)
0.156-10 ng/mL 人水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9
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