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上海谷研實業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2022-04-22 11:08:44瀏覽次數(shù)：239
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X1137 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 大鼠視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1137 |
商品介紹：
名稱 大鼠視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞 2.組織來源：眼球 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 大鼠視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞分離自視神經(jīng)乳頭；視乳頭位于黃斑區(qū)鼻側(cè)附近，境界清楚，呈白色、圓盤狀，因此也稱為視盤。視網(wǎng)膜上視覺纖維在此匯集，并于此穿出眼球向視中樞傳遞。視乳頭中央有一小凹陷區(qū)，稱為視杯或生理凹陷。視乳頭是視神經(jīng)纖維聚合組成視神經(jīng)的起始端，它沒有視細(xì)胞，因而沒有視覺，在視野中是生理盲點。視乳頭是開角型青光眼最早受損的部位，星形膠質(zhì)細(xì)胞是視神經(jīng)乳頭處主要的膠質(zhì)細(xì)胞類型，可為視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞無髓鞘的軸突提供結(jié)構(gòu)和生物支持。胞軸突喪失并伴有視乳頭處細(xì)胞外基質(zhì)重坦為主要特征。導(dǎo)致視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞喪失的病理生理機制尚未*闡明，神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞對調(diào)控神經(jīng)元微環(huán)境起多重作用，越來越多的證據(jù)表明膠質(zhì)細(xì)胞町能對神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育、損傷、修復(fù)及再生起極為關(guān)鍵的作用。視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞胞體多扁平，體積較大，形狀多呈不規(guī)則的多邊形，突起較粗，胞核為橢圓形，核仁清晰可見，核周有較密集物質(zhì)，胞質(zhì)稀疏，骨架結(jié)構(gòu)良好，明顯不同于長梭形的成纖維細(xì)胞形態(tài)。 5.方法簡介： 實驗室分離的大鼠視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法、結(jié)合差速貼壁制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的大鼠視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-R146 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)梭形、多角形 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
CSNK1G2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標(biāo)簽
PRSS23 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標(biāo)簽
FEN1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標(biāo)簽
USP18 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標(biāo)簽
CTSH 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標(biāo)簽
WDR5 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標(biāo)簽
CAPN3 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標(biāo)簽
C1QC 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標(biāo)簽
METTL7A 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標(biāo)簽
LYPLA2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標(biāo)簽
大鼠視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Low affinity immunoglobulin epsilon Fc receptor
0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human Beta-secretase 1
7.8-500 pg/mL ELISA Kit for Cholesterol
蛋白胨（250g） 英文名稱：Peptone 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Zinc finger protein SNAI2
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Neprilysin
KF鏈球菌瓊脂 英文名稱：KF Streptococcus Agar 產(chǎn)品規(guī)格：100
1.56-100 ng/mL 人核糖核酸7(RNase 7)ELISA試劑盒
碘液 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：2ml*20支
0.312-20 ng/mL 人驅(qū)動蛋白家族成員5A(KIF5A)ELISA試劑盒
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