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詳細介紹
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產品屬性：
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
| 前列腺平滑肌細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X0769 |
商品介紹：
名稱 前列腺平滑肌細胞 2.組織來源：前列腺 3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介： 人前列腺平滑肌細胞分離自前列腺組織；前列腺（Prostate）是雄性*的性腺器官；前列腺是不成對的實質性器宮，由腺組織和肌組織構成。前列腺如栗子，底朝上，與膀胱相貼，尖朝下，抵泌尿生殖膈，前面貼恥骨聯合，后面依直腸。前列腺腺體的中間有尿道穿過，扼守著尿道上口，所以，前列腺有問題時，排尿首先受影響。前列腺是機體非常少有的，具有內、外雙重分泌功能的性分泌腺。作為外分泌腺，前列腺每天分泌前列腺液，是構成精液主要成分；作為內分泌腺，前列腺分泌的激素稱為“前列腺素"。前列腺平滑肌細胞是前列腺的重要結構組成細胞之一，在機體的正常生理過程中發揮著重要作用。前列腺平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。 5.方法簡介： 實驗室分離的人前列腺平滑肌細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： 實驗室分離的人前列腺平滑肌細胞經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息： 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-H021 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態成纖維細胞樣 傳代特性可傳5代左右；3代以內狀態最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
HVEM / TNFRSF14 基因全長ORF克隆
CD50 / ICAM3 基因全長ORF克隆
ICAM-2 / CD102 轉錄變體5 基因全長ORF克隆
GFRA2 基因全長ORF克隆
GFRα1 / GDNFRA 轉錄變體2 基因全長ORF克隆
HGFA 基因全長ORF克隆
OBCAM / OPCML 轉錄變體1 基因全長ORF克隆
MMP-9 基因全長ORF克隆
HMGB1 / HMG1 基因全長ORF克隆
HB-EGF 基因全長ORF克隆
前列腺平滑肌細胞DTA培養基 英文名稱：Dextrose Tryptone Agar Medium 產品規格：250g
0.47-30 ng/mL ELISA Kit for Human DNA-directed RNA polymerase III subunit RPC9
3.12-200 U/L 人乳酸脫氫(LDH)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 人誘導蛋白(DEXI)ELISA試劑盒
C.L.E.D培養基添加劑 英文名稱：C.L.E.D Medium Supplement 產品規格：1ml*5支
78-5000 pg/mL 人磷脂酰肌醇-5-鹽4-激2γ型(PIP4K2C)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 人血小板衍生生長因子受體β(PDGFR-β)ELISA試劑盒
31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Protein fem-1 homolog A
0.78-50 ng/mL 人FAM214A蛋白(Protein FAM214A)ELISA試劑盒
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Acetylcholinesterase
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