詳細介紹
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產品屬性:
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
小鼠海馬神經元細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X1027 |
商品介紹:
名稱 小鼠海馬神經元細胞 2.組織來源:腦海馬體 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 小鼠海馬神經元細胞分離自海馬體;海馬體(Hippocampus),又名海馬回、海馬區、大腦海馬,海馬體主要負責記憶和學習。海馬神經元細胞是海馬區的主要細胞組成,主要功能是參與近期記憶、情緒及內臟功能調節、是老年性癡呆、癲癇等疾病的主要病灶之一。海馬屬于大腦的邊緣系統,在學習、記憶、情緒反應及神經系統疾病的病理生理變化等方面有重要作用,而且海馬組織是中樞神經系統內主要的神經干細胞聚集區,具有高度序化板層結構和神經元相對獨立分布的特點,境界相對清晰,便于取材,因此,海馬神經元體外培養模型被廣大基礎醫學和臨床醫學研究者當做理想的實驗模型。海馬神經元細胞培養是研究神經細胞生物學特性和外源干擾因素作用(細胞因子)的有效細胞模型,其在神經生物學,發育生物學體外實驗研究中已被廣泛應用。 5.方法簡介: 實驗室分離的小鼠海馬神經元細胞采用胰蛋白酶消化法、神經元專用培養基培養篩選結合化學試劑抑制法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 實驗室分離的小鼠海馬神經元細胞經β-Tubulin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 包被條件PLL(0.1mg/ml) 培養基含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-M107 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態神經元細胞樣 傳代特性屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠 CD302 基因全長ORF克隆
大鼠 CD300LG 基因全長ORF克隆
大鼠 CD300E 基因全長ORF克隆
大鼠 CD300A 基因全長ORF克隆
大鼠 CNTN5 基因全長ORF克隆
大鼠 SLC44A1 基因全長ORF克隆
大鼠 F3 基因全長ORF克隆
大鼠 ACE 基因全長ORF克隆
大鼠 NTRK1 基因全長ORF克隆
大鼠 MFI2 基因全長ORF克隆
小鼠海馬神經元細胞0.312-20 ng/mL 人前列腺干細胞抗原(Prostate stem cell antigen)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL 腦膜炎奈瑟菌C群(NM-C)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
78-5000 pg/mL 豬鏈球菌Ⅱ型(SS-Ⅱ)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
李斯特氏菌增菌肉湯(LEB) 英文名稱:Listeria Enrichment Broth 產品規格:250g
TPY肉湯 英文名稱:TPY Broth 產品規格:250g
0.156-10 nmol/mL 人Myocardin(MYOCD)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Platelet-activating factor
1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Major facilitator superfamily domain-containing protein 2A
MRS肉湯 英文名稱:MRS Broth 產品規格:250g
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human T-box transcription factor TBX3