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大鼠軟骨細胞

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更新時間:2022-04-19 14:49:04瀏覽次數(shù):263

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X0985 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
大鼠軟骨細胞的相關(guān)*:細胞CDK5/P35激活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 20次
組織CDK5/P35激活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 20次
細胞CDK6/CYC D1激活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 20次
組織CDK6/CYC D1激活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 20次
細胞CDK6/CYC D3激活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 20次
組織CDK6/CYC D

詳細介紹

產(chǎn)品屬性: 

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

大鼠軟骨細胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X0985

商品介紹:

名稱    大鼠軟骨細胞 

2.組織來源:軟骨組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介:

大鼠軟骨細胞分離自軟骨組織;軟骨組織由軟骨細胞、基質(zhì)及纖維構(gòu)成。軟骨組織再生能力強,這些增生的幼稚細胞形似纖維母細胞,以后逐漸變?yōu)檐浌悄讣毎?,并形成軟骨基質(zhì),細胞被埋在軟骨陷窩內(nèi)而變?yōu)殪o止的軟骨細胞。根據(jù)軟骨組織內(nèi)所含纖維成分的不同,可將軟骨分為透明軟骨、彈性軟骨和纖維軟骨三種,其中以透明軟骨的分布較廣,結(jié)構(gòu)也較典型。軟骨細胞(chondrocyte)位于軟骨陷窩內(nèi)。幼稚的軟骨細胞位于軟骨組織的表層,單個分布,體積較小,呈橢圓形,長軸與軟骨表面平行,越向深層的軟骨細胞體積之間增大呈圓形,細胞核圓形或卵圓形,染色淺,細胞質(zhì)弱嗜堿性,常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的軟骨細胞多2-8個成群分布于軟骨陷窩內(nèi),這些軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成,稱為同源細胞群。電鏡下,軟骨細胞有突起和皺褶,細胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體。在組織切片中,軟骨細胞收縮為不規(guī)則形,在軟骨囊和細胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

5.方法簡介:

實驗室分離的大鼠軟骨細胞采用膠原酶-中性蛋白酶聯(lián)合消化制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的大鼠軟骨細胞經(jīng)型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產(chǎn)品貨號CM-R087

換液頻率每3-4天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)梭形、多角形

傳代特性可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO25%

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

大鼠 MTFP1 基因全長ORF克隆

大鼠 LEPROT 基因全長ORF克隆

大鼠 ARPC1A 基因全長ORF克隆

大鼠 NDUFS2 基因全長ORF克隆

大鼠 MFGE8 基因全長ORF克隆

大鼠 SMNDC1 基因全長ORF克隆

大鼠 PRDX1 基因全長ORF克隆

大鼠 TGM2 基因全長ORF克隆

大鼠 COPS4 基因全長ORF克隆

大鼠 MNAT1 基因全長ORF克隆

大鼠軟骨細胞HBI沙門氏菌生化鑒定條(SN) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:5條/盒

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human D-aspartate oxidase

78-5000 pg/mL 人受體2(SSTR2)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mL 人神經(jīng)疾病靶標酯(NTE)ELISA試劑盒

TSA-YE平板(9cm) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:9cm*10

SOB培養(yǎng)基 英文名稱:SOB Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g

0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Omega-3 fatty acid receptor 1

固氮根瘤菌培養(yǎng)基 英文名稱:Nitrogen-fixing Rhizobium medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g

31.2-2000 pg/mL 人皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA試劑盒

0.078-5 ng/mL 人酐3(Carbonic anhydrase 3)ELISA試劑盒

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