詳細介紹
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
產品屬性:
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
前列腺癌組織源細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X1159 |
商品介紹:
名稱 前列腺癌組織源細胞 2.組織來源:前列腺癌組織 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 人前列腺癌組織源細胞分離自患有前列腺癌病人的前列腺癌組織;前列腺癌是指發生在前列腺的上皮性惡性腫瘤。2004年WHO《泌尿系統及男性生殖器官腫瘤病理學和遺傳學》中前列腺癌病理類型上包括腺癌(腺泡腺癌)、導管腺癌、尿路上皮癌、鱗狀細胞癌、腺鱗癌。其中前列腺腺癌占95%以上,因此,通常我們所說的前列腺癌就是指前列腺腺癌。前列腺癌的發生與遺傳因素有關,如果家族中無患前列腺癌者的相對危險度為1,絕對危險度為8;則遺傳型前列腺癌家族成員患前列腺癌的相對危險度為5,絕對危險度為35~45。此外,前列腺癌的發病與性活動、飲食習慣有關。性活動較多者患前列腺癌的風險增加。高脂肪飲食與發病也有一定關系。此外,前列腺癌的發病與種族、地區、宗教信仰可能有關。 5.方法簡介: 實驗室分離的癌組織源細胞采用膠原酶消化、經Percoll離心純化制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 實驗室分離的人前列腺癌組織源細胞經檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-H155 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態梭形、多角形 傳代特性可傳5代左右;3代以內狀態最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Wnt-1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶HA標簽
Wnt-1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
Wnt-1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
BMP-4 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
ErbB4 / HER4 轉錄變體JM-a / CVT-2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
PDCD1LG2 / PD-L2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
DCN / Decorin 轉錄變體A1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶HA標簽
小鼠 FLT3 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
ATPIF1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽
PLXNA1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
前列腺癌組織源細胞15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Biopterin
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Integrin beta-1
15.6-1000 ng/mL 妊娠特異性β1-糖蛋白1ELISA試劑盒
0.78-50 ng/mL 人堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 人犬尿(Kynureninase)ELISA試劑盒
吡哆醇Y培養基 英文名稱:Pyridoxine Y medium 產品規格:250g
1.56-100 ng/mL 豬乙型腦炎病毒(JEV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法)
改良Camp-BAP氏瓊脂添加劑B 英文名稱:Modified Camp-BAP Agar additive B 產品規格:1ml*5
78-5000 pg/mL 人血管性血友病因子裂解蛋白(ADAMTS13/vWF-cp)ELISA試劑盒
3.12-200 pg/mL 人神經絲重鏈(NFH)ELISA試劑盒