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大鼠腸道干細胞

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更新時間:2022-04-22 11:52:56瀏覽次數:257

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×10?Cells/T25培養瓶
貨號 GOY-01X1161 應用領域 化工
主要用途 產品僅供科研使用    
大鼠腸道干細胞的相關*:線蟲β-半乳糖苷原位染色試劑盒 50次
線蟲β-半乳糖苷化學發光定量檢測試劑盒 20次
線蟲β-半乳糖苷比色法定量檢測試劑盒 20次
線蟲基因組DNA分離試劑盒 20次
果蠅細胞培養基 500毫升
果蠅細胞凍存試劑盒 50次

詳細介紹

產品屬性: 

產品名稱

規格

貨號

大鼠腸道干細胞

5×10?Cells/T25培養瓶

GOY-01X1161

商品介紹:

名稱    大鼠腸道干細胞 

2.組織來源:腸組織

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

大鼠腸道干細胞分離自腸道組織;腸道指的是從胃幽門至的消化管。腸是消化管中最長的一段,也是功能最重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產物的吸收都是在小腸內進行的,大腸主要濃縮食物殘渣,形成糞便,再通過直腸經排出體外。腸道堪稱身體最勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足夠的養分,其實它的功能還遠不止此——它還是機體內最大的微生態系統。腸道干細胞(ISC)也稱腸道上皮干細胞,主要位于腸黏膜隱窩內,其與腸道黏膜上皮的更新和修復密切相關。正常情況下,位于隱窩基底部的腸道干細胞不斷向隱窩頂部(腸腔方向)遷移,整個遷移過程大約3-5d,在遷移過程中腸道干細胞分化形成不同的腸黏膜細胞。當受到外界生理或病理信號作用時,ISC可持續增殖、分化為成熟腸上皮細胞,如腸型細胞、杯狀細胞、內分泌細胞和潘氏細胞等,從而維持腸道黏膜結構和功能的穩定性。

5.方法簡介:

實驗室分離的大鼠腸道干細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯合消化后,用腸道干細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的大鼠腸道干細胞MSI-1免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

產品貨號CM-R155

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性懸浮

細胞形態球形

傳代特性可傳3代左右

消化液0.25%胰蛋白酶

培養條件氣相:空氣,95%;CO25%

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 PD1 / PDCD1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽

小鼠 FGF12 轉錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶HA標簽

小鼠 CHK2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽

 CHK2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽

甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/UT31413II/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

甲型流感 H5N1 (A/Xinjiang/1/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

甲型流感 H5N1 (A/chicken/India/NIV33487/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/R0405050/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

甲型流感 H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

大鼠腸道干細胞皮質素1抗體Human GLP2(Glucagon Like Peptide 2) ELISA Kit大鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒,

8號染色體開放閱讀框70抗體Human GLUT2(Glucose Transporter 2) ELISA Kit豬傳染性胃腸炎病抗體(TGEV)ELISA試劑盒,

胰羧肽E抗體Human GKN1(Gastrokine 1) ELISA Kit兔抗平滑肌抗體(ASMA) ELISA試劑盒,

化角蛋白18抗體Human GLUT4(Glucose Transporter 4) ELISA Kit兔功能相關抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒,

20號染色體開放閱讀框112抗體Human GM-CSF Ab(Anti-Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor Antibody) ELISA Kit魚類狀腺原(T3)ELISA試劑盒,

10號染色體開放閱讀框88抗體Human Glyoxalase I(GLO1) ELISA Kit抗乙型肝炎病核心IgM抗體(HBcAb-IgM)ELISA試劑盒--動物,人

富含半胱C端蛋白1抗體Human GNβ1(G Protein Beta 1) ELISA Kit膽硫乳瓊脂(DHL)

E1A激活基因激蛋白2抗體Human GP-73(Golgi Protein 73) ELISA Kit麥芽浸膏湯   用于酸性罐頭食品商業無檢驗

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