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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2022-04-13 09:32:15瀏覽次數(shù)：294
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X0749 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 呼吸道上皮細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0749 |
商品介紹：
名稱 呼吸道上皮細(xì)胞 2.組織來源：呼吸道 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 人呼吸道上皮細(xì)胞分離自呼吸道；呼吸道是肺呼吸時氣流所經(jīng)過的通道，有肺脊椎動物的呼吸道分上、下兩部：鼻、咽和喉合稱上呼吸道。氣管及其以后一分再分的管道，合稱為下呼吸道，或稱為氣管樹。氣管樹是隨著動物的進(jìn)化逐漸復(fù)雜化的。整個呼吸道內(nèi)表面都分布有分泌液和纖毛（鼻孔、咽后壁和聲帶黏膜除外），它能溫暖（或冷卻）、濕潤和凈化吸入的空氣，對于呼吸器官和機(jī)體有著保護(hù)作用。呼吸道以骨或軟骨做支架，其內(nèi)表面覆蓋著黏膜，黏膜內(nèi)分布著豐富的毛細(xì)血管。呼吸道上皮細(xì)胞屬于假復(fù)層纖毛柱狀上皮，分布于呼吸道的內(nèi)表面，主要由柱狀，杯形，梭形和錐形等不同形狀細(xì)胞組成。看上去像復(fù)層上皮，但實(shí)際上所有細(xì)胞底部均附于基膜上，屬單層上皮，故稱假復(fù)層柱狀上皮，上皮表面有纖毛，杯狀細(xì)胞可分泌粘液，包裹著大量細(xì)菌，借助纖毛不斷擺動將其慢慢移動至出消化道。 5.方法簡介： 實(shí)驗(yàn)室分離的人呼吸道上皮細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實(shí)驗(yàn)室分離的人呼吸道上皮細(xì)胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-H016 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
XPNPEP1 基因全長ORF克隆
BMPR-II 基因全長ORF克隆
ACP5 / TRAP 轉(zhuǎn)錄變體4 基因全長ORF克隆
ACY1 基因全長ORF克隆
STAT2 基因全長ORF克隆
Rad17 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆
TFPI2 基因全長ORF克隆
VEGF-B 基因全長ORF克隆
SGK1 / SGK 基因全長ORF克隆
VEGF-C 基因全長ORF克隆
呼吸道上皮細(xì)胞0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Filamin-B
改良GAM肉湯 英文名稱：GAM Broth,Modified 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Nebulette
31.2-2000 pg/mL 人白介素12B(IL-12/P40)ELISA試劑盒
1.56-100 ng/mL 人二硫化物異構(gòu)A4蛋白(PDIA4)ELISA試劑盒
62.5-4000 pg/mL ELISA Kit for Human Alpha-2-antiplasmin
胰蛋白胨 英文名稱：Tryptone 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.312-20 ng/mL 人雙特異性促分裂原活化蛋白激激5(MAP kinase kinase 5)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 人質(zhì)子相關(guān)糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白A(PAST-A)ELISA試劑盒
pH7.3PBS緩沖液 英文名稱：PBS 產(chǎn)品規(guī)格：250g
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