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詳細介紹
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
產品屬性：
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
| 小鼠腎小球系膜細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X0905 |
商品介紹：
名稱 小鼠腎小球系膜細胞 2.組織來源：腎組織 3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介： 小鼠腎小球系膜細胞分離自腎小球組織；腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團毛細血叢，被鮑氏囊所包裹，是尿液形成的重要構造。血液經由入球小動脈進入腎小球。腎小球內的微血管不像其他微血管，匯流入靜脈，而是流入出球小動脈。在腎小球內，微血管受到高壓，而加速了超濾作用（hyperfiltration）的進行。微血管中的血液經由超濾作用之后，形成濾液，滲入鮑氏囊內。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體，腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。腎小球系膜是位于腎小球毛細血管袢之間的一種特殊間充質，由系膜細胞和系膜基質組成。腎小球系膜細胞是腎小球內非常活躍的細胞，具有分泌細胞基質、產生細胞因子、吞噬和清除大分子物質及類似平滑肌細胞收縮的功能。腎小球系膜細胞增生和基質的過多產生是多種腎小球腎炎的主要病理表現。腎小球系膜細胞的培養是研究系膜擴張、瘢痕形成和腎小球硬化的理想方法。系膜細胞的主要作用可能有：①收縮作用，入球小動脈和出球動脈的收縮作用受系膜細胞的調節，以影響毛細血管袢的內壓和濾過率；②支持作用，它填充于毛細血管袢之間，支持毛細血管的位置；③吞噬作用，能吞噬被阻留在基膜內的大分子物質和蛋白質；④分泌腎素，在腎缺血或免疫復合物沉積時，系膜細胞增生且分泌腎素。 5.方法簡介： 實驗室分離的小鼠腎小球系膜細胞采用機械研磨法結合不同孔徑不銹鋼網篩過濾后使用膠原酶消化制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： 實驗室分離的小鼠腎小球系膜細胞經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml） 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-M057 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態梭形、多角形 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠 CXCL9 基因全長ORF克隆
小鼠 WNT5A 基因全長ORF克隆
小鼠 TGF-beta2 基因全長ORF克隆
小鼠 TRHDE 基因全長ORF克隆
小鼠 CXCL11 基因全長ORF克隆
小鼠 CXCL1 基因全長ORF克隆
小鼠 TREM2 基因全長ORF克隆
小鼠 TNFRSF19 / TROY 基因全長ORF克隆
小鼠 CXCL15 / Lungkine 基因全長ORF克隆
小鼠 Thrombopoietin / THPO 基因全長ORF克隆
小鼠腎小球系膜細胞0.312-20 ng/mL 硫酸角質素(KS)ELISA試劑盒
0.625-40 ng/mL 人Sestrin 1(SESN1)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human V(D)J recombination-activating protein 2
緩沖李氏菌增菌肉湯基礎(BLEB) 英文名稱：Buffered Listeria Enrichment Broth 產品規格：250g
7.8-500 pg/mL ELISA Kit for Human Mitochondrial peptide methionine sulfoxide reductase
15.6-1000 pg/mL 人S100B蛋白(S100-B)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Integrin alpha-4
0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human Cyclin-dependent kinase 5
0.156-10 ng/mL 人黑素細胞蛋白PMEL(Melanocyte protein PMEL)ELISA試劑盒
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Glutamine synthetase
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