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技術文章

豬胸膜肺炎放線桿菌PCR試劑盒擴增產物分析

閱讀:137          發(fā)布時間:2020-4-21

豬胸膜肺炎放線桿菌PCR試劑盒擴增產物在電泳分析時沒有條帶或條帶很淺

1)zui常見的原因在于您的反應體系是PCR的反應體系而不是RT-PCR的反應體系

3) 與反應起始時RNA的總量及純度有關

4) 建議在試驗中加入對照RNA

5) di一鏈的反應產物在進行PCR擴增時,在總的反應體系中的含量不要超過1/10

6) 目的mRNA中含有強的轉錄中止位點,可以試用以下方法解決:

a. 將di一鏈的反應溫度提高至50℃。

b. 使用隨機六聚體代替Oligo(dT)進行di一鏈反應。

7) 建議用Oligo(dT)或隨機引物代替基因特異性引物(GSP)用于di一鏈合成。由于RNA模板存在二級結構,如環(huán)狀結果,有可能導致GSP無法與模板退火;或SSⅡ反轉錄酶無法從此引物進行有效延伸。

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